[发明专利]天然植物抗球虫饲料添加剂的薄层色谱鉴别方法

说明书

本发明涉及天然植物抗球虫饲料添加剂的薄层色谱鉴别方法，其是以橙皮苷、咖啡酸、绿原酸、芦荟苷4种成分作为特征成分进行检测。所述方法包括制备供试品、对照品溶液，薄层板点样，展开，晾干，喷以显色剂进行显色以及结果判读等步骤。本发明首次采用薄层色谱法鉴别天然植物抗球虫饲料添加剂产品，该方法操作简单，重复性好，可信度高，便于药材加工、销售企业和药品检验单位推广应用。

技术领域

本发明涉及薄层色谱检测技术，具体地说，涉及天然植物抗球虫饲料添加剂的薄层色谱鉴别方法。

背景技术

在禽类养殖中，球虫病是严重危害养殖业的疾病之一，该病的发生率极高，分布范围广，其病死率可达40％～80％。爱绿爽是北京爱绿生物科技有限公司生产的一种安全高效、无残留、不易产生耐药性的抗球虫饲料添加剂(参见ZL201410832060.X，发明名称：一种天然植物抗球虫饲料添加剂及其应用)。该饲料添加剂能有效抑杀球虫的孢子、第一代及第二代裂殖体，降低其发病率及避免发病区域继续扩大；同时提高机体免疫与抗病力，降低病原球虫对机体的侵染；保护和修复受损胃肠粘膜，促进营养物质的吸收，具有抑杀球虫、增强免疫力、修复胃肠道三重功效，该产品绿色环保，适合在畜牧业领域大力推广。

为保护广大消费者的利益，打击不法销售现象，开发一种简便快速的鉴别爱绿爽产品真伪的方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供天然植物抗球虫饲料添加剂的薄层色谱鉴别方法。

本发明构思如下：天然植物抗球虫饲料添加剂(爱绿爽产品)中，含有黄芪提取物、青蒿提取物、常山提取物、仙鹤草提取物、杜仲提取物、蒲公英提取物、苍术提取物、桑叶提取物、芦荟提取物、陈皮提取物、山楂提取物、甘草提取物等，根据产品抗球虫机理，其中有效成分主要为橙皮苷(原药材陈皮)、咖啡酸(原药材蒲公英)、绿原酸(原药材蒲公英)、芦荟苷(原药材芦荟)、黄芪甲苷(原药材黄芪)、青蒿素(原药材青蒿)、常山碱(原药材常山)、甘草酸(原药材甘草)等，上述8种成分的理化特性有所不同，其中橙皮苷、咖啡酸、绿原酸、芦荟苷等4种成分理化性质相近，在现有的薄层鉴别法中采用相似的前处理方法和展开系统，由此将这4种成分作为爱绿爽产品的特征成分进行检测。

为了实现本发明目的，本发明提供的天然植物抗球虫饲料添加剂的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：

1)对待测样品进行前处理得到供试品溶液；

2)分别配制橙皮苷、咖啡酸、绿原酸、芦荟苷对照品溶液；

3)将上述供试品溶液和对照品溶液依次点样于同一薄层板的同一水平线的不同位置上，然后将薄层板置于展开剂中上行展开，展距13-15cm，结束展开；

4)取出薄层板，晾干后喷以显色剂进行显色，根据显色结果判定待测样品是否为天然植物抗球虫饲料添加剂产品。

本发明中采用体积比为10:5:0.1:2的氯仿-甲醇-甲酸-水作为展开剂。

前述的方法，步骤1)具体为：取待测样品1-2g，加入甲醇10-20mL溶解，超声处理15-20分钟，滤过，收集滤液，将滤液蒸干，向残渣中加入甲醇1-2mL溶解，作为供试品溶液；其中，超声条件为40-60W，35-45Hz。优选地，取待测样品2g，加入甲醇20mL溶解，超声处理20分钟，滤过，收集滤液，将滤液蒸干，向残渣中加入甲醇2mL溶解，作为供试品溶液；其中，超声条件为60W，45Hz。

前述的方法，步骤2)所述对照品溶液为橙皮苷、咖啡酸、绿原酸、芦荟苷的甲醇溶液，浓度分别为1mg/mL、0.5mg/mL、1mg/mL、1mg/mL。

步骤1)和2)中优选以甲醇为溶剂。