[发明专利]一种测定水产饲料中甲基汞和乙基汞的方法

说明书

本发明公开了一种测定水产饲料中甲基汞和乙基汞的方法，该法采用同时蒸馏萃取法对样品进行同时提取与萃取，水反萃取，然后采用四丙基硼化钠作为衍生试剂进行衍生化反应，最后用全自动烷基汞测定仪对水产饲料中的甲基汞和乙基汞进行测定。本发明甲基汞的方法检出限为2μg/kg，定量限为6μg/kg，相对标准偏差为4.58％，平均加标回收率在90.6％～97.3％之间；乙基汞的方法检出限为4μg/kg，定量限为11μg/kg，相对标准偏差为5.19％，平均加标回收率在89.2％～96.7％之间，灵敏度高，重复性好，准确性好，尤其是方法检出限和定量限特别适用于水产饲料中甲基汞和乙基汞的测定。

【技术领域】

本发明涉及一种测定水产饲料中甲基汞和乙基汞的方法，属于检测方法技术领域。

【背景技术】

汞是一种具有严重生理毒性的化学物质，其毒性与存在形态密切相关，在自然界中主要以无机汞和有机汞等形式存在，有机汞的毒性强于无机汞,其中甲基汞是毒性最强的有机汞，乙基汞的毒性次之。甲基汞和乙基汞均具有亲脂性、生物累积性和生物放大效应，可在鱼、贝等水生动物体内富集，并通过食物链迁移转化危害人体健康，其主要靶器官是大脑。因此，自日本水俣病事件发生后，甲基汞造成的食源性危害引起了世界的广泛关注。

水产饲料原料包括鱼粉、虾头粉、粮食原粮等，有文献指出，鱼、虾、大米对甲基汞和乙基汞有特殊的蓄积性，这说明由鱼粉、虾粉、和粮食原粮(大米)制成的水产饲料中可能含有甲基汞和乙基汞，可成为水产品中甲基汞和乙基汞的来源之一，而水产品是人类甲基汞和乙基汞暴露的主要途径，与人们身体健康密切相关。因此，对水产饲料中甲基汞和乙基汞检测方法的研究具有重要意义。

专利文献CN 105203666 B(一种检测水产饲料中甲基汞、乙基汞和无机汞的方法)提出了一种检测水产饲料中甲基汞、乙基汞和无机汞的方法，该法利用L-半胱氨酸震荡离心对样品进行前处理，高效液相色谱-冷蒸汽发生原子荧光光谱法进行检测，具有方法简单、快速、试剂绿色无毒等优点。但由于流动相的稀释，其检出限相对较高，其中甲基汞检测限为0.023mg/kg，乙基汞检测限为0.047mg/kg。对于甲基汞和乙基汞含量水平很低的水产饲料来说，该方法不能完全满足水产饲料中痕量甲基汞和乙基汞的测定要求。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能准确测定水产饲料中甲基汞和乙基汞的方法及前处理方法。本发明方法采用同时蒸馏萃取法对水产饲料样品同时提取与萃取，水反萃取，然后用四丙基硼化钠作为衍生试剂进行衍生化反应，最后用全自动烷基汞测定仪上机测定，具有灵敏度高、准确性好等优点。

本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：

一种测定水产饲料中甲基汞和乙基汞的方法，其特征在于包括前处理和检测分析，所述的前处理包括以下步骤：

a、制备样品溶液和空白溶液：

将水产饲料样品干燥制成粉末，称取1g粉末加入溴化钾溶液和硫酸铜溶液混合成样品混合液，浸泡至少2h后与溶剂二氯甲烷进行同时蒸馏萃取，收集有机相，加入去离子水和聚四氟乙烯沸石，采用加热方式进行反萃取，直至二氯甲烷完全挥发，用去离子水定容，得到样品溶液，同时做空白试验得到空白溶液。

本发明中，溴化钾溶液的浓度为7.0～7.5％(g/ml)，用量为35～40mL。溴化钾溶液配制方法为称取7.2g溴化钾于100mL容量瓶中，用2％(V/V)硫酸定容至刻度。

硫酸铜溶液配制方法为称取25g五水硫酸铜于100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，硫酸铜溶液的用量为3mL。

本发明中，样品混合液的加热温度为100～120℃，二氯甲烷的加热温度为55～65℃，用量为20～25mL，蒸馏萃取时间至少2h。

本发明中，反萃取时去离子水的加入量为30～35mL，反萃取温度为60～65℃。反萃取时间在可见的有机相消失后还需要3～4h使二氯甲烷完全挥发。