[发明专利]医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法在审
| 申请号： | 201811122149.1 | 申请日： | 2018-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN109251885A | 公开（公告）日： | 2019-01-22 |
| 发明（设计）人： | 武洪淼;袁蕊;杨弘哲;王军;蒋湘峰;高莉 | 申请（专利权）人： | 北京添易医学研究院 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;A61K8/99;A61K8/98;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 100000 北京市朝阳*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胎盘 蜕膜 干细胞 制备 内液 培养皿 应用技术领域 肌肤组织 皮肤吸收 皮下组织 庆大霉素 医院医疗 超滤膜 活性高 裂解液 膜分离 眼科剪 新生儿 盘状 冲洗 冷冻 废物 融化 储存 屏障 细胞 吸收 | ||
1.医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法，其特征在于：所述的具体制备方法为：步骤一、胎盘的选择：选择35-40周新生儿盘状胎盘、一级胎盘，采集产妇的外周血，采用ELASA方法检测乙肝、丙肝、梅毒、艾滋、EB病毒、嗜热T细胞病毒为阴性；
步骤二、胎盘基蜕膜的分离、将含有庆大霉素的PBS缓冲液反复冲洗胎盘，用眼科剪取胎盘基蜕膜部分到培养皿中；
步骤三、胎盘基蜕膜干细胞内液的制备，在GMP制备车间中将剪碎的胎盘基蜕膜放到50毫升离心管中，加入3毫升的3mg/ml的胶原蛋白酶I消化60分钟，加入DMEM/F12培养基终止消化，在2200rpm/min下离心5分钟，弃掉上清，在细胞沉淀中加入20毫升无血清细胞培养基中培养，每3天换液，第7-15天，观察到梭形细胞长出，7-8个克隆的时候可以传代、冻存；
步骤四、医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法：选择超滤膜，将胎盘基蜕膜干细胞裂解液进行膜分离，在-20℃冷冻储存，医美使用时室温融化即可。
2.根据权利要求1所述的医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法，其特征在于：所述的步骤一中的胎盘在无菌状态下取得，并在运输的过程中需要冷链运输，冷冻储存。
3.根据权利要求1所述的医美级胎盘基蜕膜干细胞内液的制备方法，其特征在于：所述的步骤四中使用的超滤膜选择截留分子量范围在1000～300000的超滤膜。
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