[发明专利]扩大T细胞的方法

权利要求书

1.体外扩大抗原特异性T细胞如自体抗原特异性T细胞的方法，包括步骤：

a)在存在下列的情况下培养自体PBMC细胞群：

i)已用与靶抗原(一种或多种)相关的肽/肽混合物脉冲的树突细胞或与靶抗原(一种或多种)相关的肽/肽混合物，和

ii)至少一种细胞因子，和

b)在存在下列的情况下培养来自步骤a)的T细胞群：

i)已用与靶抗原(一种或多种)相关的肽/肽混合物脉冲的树突细胞，或已用与靶抗原(一种或多种)相关的肽/肽混合物脉冲的自体抗原递呈T细胞(T-APC’s)细胞以及人造共同刺激因子，和

ii)任选地，细胞因子，并且

其特征在于，所述方法在相关T细胞群扩大中不采用活病毒和/或病毒载体或编码抗原的DNA或RNA的使用。

2.根据权利要求1所述的方法，其中实施步骤b)两次或更多次(如3、4、5次或更多次)，直到获得足够数量的所述相关T细胞群。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤a)的培养进行12天或更少。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中步骤b)的培养步骤进行12天或更少。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中培养在包括透气性培养表面的容器中进行。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中扩大的T细胞对EB病毒、牛痘病毒或水痘带状疱疹病毒抗原或抗原如EBV具有特异性。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中步骤a)和/或b)的肽包括2和1000种之间的肽，例如，2至500种肽、2至300种肽或2至100种肽。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中步骤a)和/或b)的肽重叠，例如，重叠2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或更多个氨基酸。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中步骤a)和/或b)的肽为约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸的长度，如15个氨基酸的长度。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中部分a)和/或b)的肽覆盖抗原LMP1的部分或全长。