[发明专利]利用肿瘤特异性启动子介导的PE38KDEL基因表达质粒的构建方法及应用有效
| 申请号： | 201811138316.1 | 申请日： | 2018-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN109207488B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 施维;郭琼;吴江 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N15/85;C12N1/21;A61K48/00;A61K38/16;A61P35/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 130000 吉林省长春市前*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 肿瘤 特异性 启动子 pe38kdel 基因 表达 质粒 构建 方法 应用 | ||
1.一种含有PE38KDEL基因的重组质粒，所述重组质粒以pGL3-Basic为原始质粒，在pGL3-Basic的多克隆位点插入肿瘤特异性启动子，并利用PE38KDEL基因替换原荧光素酶基因；所述肿瘤特异性启动子为SERPINB3启动子或CEACAM6启动子；所述PE38KDEL基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述SERPINB3启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
3.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述CEACAM6启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
4.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述肿瘤特异性启动子插入在原始质粒pGL3-Basic上的NheI和NcoI酶切位点之间。
5.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述PE38KDEL基因插入在原始质粒pGL3-Basic上的NcoI和XbaI酶切位点之间。
6.权利要求1~5任意一项所述的重组质粒的构建方法，包括以下步骤：
将pGL3-Basic与SERPINB3启动子或CEACAM6启动子分别双酶切回收后进行连接，得到pSERPINB3-Basic质粒或pCEACAM6-Basic质粒；
将所述步骤1）中得到的pSERPINB3-Basic质粒或pCEACAM6-Basic质粒与PE38KDEL基因分别双酶切回收后进行连接，得到重组质粒pSERPINB3-PE38KDEL质粒或pCEACAM6-PE38KDEL质粒。
7.权利要求1~5任意一项所述的重组质粒或者权利要求6所述构建方法得到的重组质粒在制备靶向性抑制和杀伤口腔鳞癌细胞的药物中的应用。
8.一种包含权利要求1~5任意一项所述重组质粒的重组菌株。
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