[发明专利]高通量受体:配体鉴定方法

说明书

本申请涉及高通量受体:配体鉴定方法。本发明提供了用于高通量鉴定受体:配体相互作用的方法和系统。本申请全篇，在括号内提到各种出版物。在说明书的结尾处可找到对这些参考文献的完整引用。这些出版物及本文提到的所有专利、专利申请公布和书籍的公开内容均特此以引用的方式整体并入本申请中以更全面地描述本发明所属的领域。

本申请是申请日为2013年12月5日、中国申请号为201380071758.8、发明名称为“高通量受体:配体鉴定方法”的发明申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2012年12月11日提交的美国临时申请第61/735,791号和2013年6月11日提交的美国临时申请第61/833,588号的权益，其各自的内容特此以引用的方式并入。

政府支持的声明

本发明根据美国国家卫生研究院(National Institutes of Health)授予的授权编号3U54GM094662-02、5U01GM094665-02和AI057158在政府支持下进行。政府具有本发明的某些权利。

发明背景

本申请全篇，在括号内提到各种出版物。在说明书的结尾处可找到对这些参考文献的完整引用。这些出版物及本文提到的所有专利、专利申请公布和书籍的公开内容均特此以引用的方式整体并入本申请中以更全面地描述本发明所属的领域。

细胞表面受体和粘附分子是细胞功能的保卫者，对正常生理和病理重要的发育、形态发生和环境过程。这些分子是主要的治疗靶标。这些复合物的高分辨率结构表征限定了为受体:配体特异性、亲和力、寡聚状态、效价和对于将这些相互作用及其相关信号传导通路整合到整体细胞生理学中很重要的整体结构特征的基础的化学和物理决定因素。所有这些特征对于了解驱动复杂细胞过程并为治疗干预提供难得机会的基本机制至关重要。不幸的是，目前对这些关键复合物的系统性结构表征(即，分泌蛋白质组的结构基因组学)是不现实的目标，因为即使不是大多数，也有许多受体:配体对仍不明确，因此不能在结构上表征。

本发明通过提供有效且系统性鉴定与人体生理学、疾病和药品有关的受体:配体相互作用的所有组成部分的技术解决了这种需要。

发明概述

提供了一种细胞微阵列，其包括：

(i)经转化以便表达第一预定异源分泌蛋白、异源膜蛋白或异源细胞表面蛋白和第一荧光蛋白的第一多个细胞和(ii)经转化以便表达第二预定异源分泌蛋白或第二异源蛋白和第二荧光蛋白的至少第二多个细胞，

其中所述第一和第二多个细胞附着于所述微阵列的固体表面，并且其中所述第一和第二多个细胞在所述固体表面上处于空间上不同的位置。

提供了一种细胞微阵列，其包括：

(i)经转化以便表达(a)第一预定异源蛋白和(b)第一荧光蛋白的第一多个细胞和(ii)经转化以便表达(a)第二预定异源蛋白和(b)第二荧光蛋白的至少第二多个细胞，

其中所述第一和第二多个细胞附着于所述微阵列的固体表面，并且其中所述第一和第二多个细胞在所述固体表面上处于空间上不同的位置。

提供了一种制备如本文所述的细胞微阵列的方法，包括：将编码所述第一异源蛋白和第一荧光蛋白的第一多个表达构建体固定在微阵列的固体表面上并且在空间上不同于所述固定的第一多个表达构建体的位置，将编码所述第二异源蛋白和第二荧光蛋白的至少第二多个表达构建体固定在所述微阵列的固体表面上，并且在包括转染剂存在的条件下使所述表达构建体与多个细胞接触，以便允许所述细胞附着于所述固体表面并且发生在每个空间上不同的位置的至少一部分细胞被所述相应表达构建体的转染。