[发明专利]用于在体基因治疗的基因编辑组合物或试剂盒

权利要求书

1.一种基因编辑组合物或试剂盒，其包含1)靶向目的突变基因的与结合蛋白的核酸分子连接的sgRNA复合物或其编码序列，2)修复目的突变基因的模板核酸或其编码序列，3)sgRNA复合物引导的核酸酶或其编码序列，和4)与核酸结合蛋白融合的促进同源重组的蛋白或其编码序列，其中所述核酸结合蛋白能够与上述1)中的核酸分子结合，其中所述促进同源重组的蛋白为RecA。

2.权利要求1所述的组合物或试剂盒，其中所述目的突变基因是由于其突变导致疾病的基因。

3.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述目的突变基因是由于其突变导致遗传性疾病的基因。

4.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述目的突变基因是Pde6b基因，Fah基因，或dystrophin基因。

5.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述sgRNA复合物为靶向所述目的突变基因的sgRNA复合物。

6.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述sgRNA复合物是包含SEQ ID NO:2所示的序列的sgRNA复合物。

7.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述核酸结合蛋白包括MS2蛋白，RPA-4亚基，BRCA2，XRCC2，XRCC3，RadA，HNRNPA1，NABP2(SSB1)，NABPI(SSB2)和UHRF1，所述结合蛋白的核酸分子包括能够被上述蛋白特异性识别的核酸序列。

8.权利要求7所述的组合物或试剂盒，其中所述结合蛋白的核酸分子包括发夹序列。

9.权利要求7所述的组合物或试剂盒，其中所述结合蛋白的核酸分子包括被MS2蛋白特异性识别的SEQ ID NO:3所示的发夹序列。

10.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中组合物或试剂盒的成分1)、2)、和3)存在于一个或多个载体中。

11.权利要求10所述的组合物或试剂盒，其中组合物或试剂盒的成分1)、2)、3)和4)存在于一个或多个载体中。

12.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述修复目的突变基因的模板核酸为将突变的目的基因恢复为野生型基因序列或所需序列的同源互补修复模板。

13.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述修复目的突变基因的模板核酸为单链模板核酸或双链模板核酸。

14.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述修复目的突变基因的模板核酸为单链DNA模板，双链DNA模板或环状质粒模板。

15.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述sgRNA复合物引导的核酸酶包括CRISPR酶。

16.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述sgRNA复合物引导的核酸酶包括Cas9。

17.权利要求1或2所述的组合物或试剂盒，其中所述sgRNA复合物引导的核酸酶包括spCas9和saCas9。

18.权利要求1-17任一项定义的组合物或试剂盒在制备用于治疗基因突变导致的疾病的药物中的用途。

19.权利要求18所述的用途，其中所述疾病为遗传性疾病。

20.权利要求19所述的用途，其中所述疾病为遗传性色素性视网膜炎、遗传性肌肉硬化症或遗传性酪氨酸血症。