[发明专利]一种检测虎杖药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒指纹图谱的高效液相方法

权利要求书

1.一种虎杖药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

1)参照物溶液制备：取对照品，溶解，即得参照物溶液；

2)供试品溶液制备：取虎杖药材或饮片或标准汤剂或配方颗粒，经提取，取续滤液，即得供试品溶液；

3)分别吸取参照物溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：230～306nm；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱程序如下：

。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述对照品包括虎杖苷、大黄素、白藜芦醇三种对照品。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述溶解是加入甲醇溶解。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述提取溶剂是指甲醇、水和稀乙醇中任一一种，加入溶剂量为样品的200倍～400倍，采用超声或回流提取，提取时间为20～40分钟。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述提取方法如下：

取虎杖标准汤剂粉末，加入200倍甲醇，称定重量，超声或回流处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得虎杖标准汤剂粉末的供试品溶液。

取虎杖配方颗粒粉末，加入400倍甲醇，称定重量，超声或回流处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得虎杖配方颗粒的供试品溶液。

取虎杖药材或饮片粉末，加入66.7倍甲醇，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得虎杖药材或饮片的供试品溶液。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所用色谱柱为Agilent ZORBAXExtend‐C18；优选柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述检测波长为280nm。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述色谱条件还包括：流速为每分钟0.8ml～1.2ml/分，柱温为20～30℃，进样量为5～20μL。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于：流速为1.0mL/min，柱温为25℃，进样量为10μL。

10.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：虎杖药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的指纹图谱的特征在于：

(1)呈现10个共有峰，其中3个峰应与虎杖苷、大黄素、白藜芦醇三种参照物峰的保留时间相同；

(2)以虎杖苷参照物相应的峰为S峰，计算10个共有峰的相对保留时间，依次应为：0.727(峰1)、1.000(峰2，S)、1.442(峰3)、1.758(峰4)、1.931(峰5)、1.998(峰6)、2.240(峰7)、2.347(峰8)、2.673(峰9)、4.529(峰10)，且各相对保留时间应在规定值的±5％之内。