[发明专利]一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测及鉴别方法

说明书

本发明提供了一种桑白皮与蜜桑白皮饮片质量检测及鉴别方法。本发明的桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，建立了桑白皮与蜜桑白皮饮片HPLC指纹图谱，明确了桑白皮与蜜桑白皮饮片的化学成分差异，阐明了炮制对桑白皮化学成分的影响，且本法相较于已有报道的薄层层析法，稳定性更好，准确度更高。为桑白皮与蜜桑白皮饮片鉴别提供了新方法。

技术领域

本发明具体涉及一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测及鉴别方法。

背景技术

桑白皮为桑科植物桑(Morus alba L.))的干燥根皮，秋末叶落时至次春发芽前采挖根部，刮去黄棕色粗皮，纵向剖开，剥取根皮，晒干即得。其为临床常用中药，主要功效为泻肺喘、利水消肿，临床常用于治疗肺热喘咳、水肿、尿少以及面部肌肤浮肿等症。桑白皮中主要含有二苯乙烯类成分和黄酮类成分。古代本草如《名医别录》等记载其治消渴，单用即有效。相关报道其有利尿、降压、降糖、镇痛、镇静、镇咳、祛痰、平喘、抗炎、抗菌、及抗癌等作用。

蜜桑白皮为桑白皮的炮制加工品，寒泻之性缓和，偏于润肺止咳，多用于肺虚喘咳，并常与补气药或养阴药合用。由于桑白皮药材与蜜桑白皮的外观性状相似，并且与同属植物单纯从外形特征上很难区分。目前市场上有用同属植物的根皮作桑白皮入药，也易将桑白皮与蜜桑白皮混淆。

中药指纹图谱是一种多指标的质量控制模式，虽然它不能代替含量测定，但它比测定任何单一成分所提供的信息却丰富得多，可以比较全面地反映所含化学成分的种类和数量，能够更加有效地体现出中药成分的整体性和综合作用。HPLC法具有高效、快速、灵敏、重现性好、应用范围广等特点，在中药的质量控制及中药有效成分研究等方面都是重要的分析手段。目前对桑白皮与蜜桑白皮饮片的鉴定，局限于外观和薄层层析法。如任婧昱，姜文红，曹飞，张清波.桑白皮与蜜桑白皮及其相近品种的鉴别研究[J].方药研究，2015.2.61‐62.，采用显微鉴别、薄层色谱法对桑白皮与蜜桑白皮及其相近品种进行鉴别区分。但是未能明确桑白皮与蜜桑白皮饮片的主要化学成分，不能说明炮制对桑白皮化学成分的影响。且还需结合显微观察才能做出判断。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：

1)参照物溶液的制备：取桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛对照品，加4050％甲醇制成参照物溶液；

2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入60～70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；

3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.05～0.15％磷酸水溶液(v/v)为流动相B梯度洗脱；波长为280nm；梯度洗脱程序如下：

进一步地，步骤1)所述桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛的浓度为每1ml分别含80μg、30μgl、30μg、30μg、30μg、30μg的溶液。

进一步地，步骤2)所述桑白皮或蜜桑白皮饮片待测样品与60％甲醇的质量体积比为1g:200mL。

进一步地，步骤2)所述提取为超声提取，提取功率为600W，提取频率为25kHz，提取时间20min。

进一步地，步骤3)所述的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；所述流动相B为0.1％磷酸水溶液(v/v)；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；进样量为10μl。

本发明还提供了一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的鉴别方法，其特征在于：它包括如下步骤：

(1)取待检桑白皮或蜜桑白皮饮片粉末制备供试品溶液；