[发明专利]用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用有效
申请号: | 201811145516.X | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109265522B | 公开(公告)日: | 2022-03-04 |
发明(设计)人: | 师东方;苏瑞红;董秀梅;唐毓;张萍 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C07K14/13 | 分类号: | C07K14/13;C12N15/45;G01N33/68 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;马鑫 |
地址: | 150000 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 犬瘟热 病毒 血凝 蛋白 抗体 聚苯乙烯 纳米 及其 制备 方法 应用 | ||
1.犬瘟热病毒重组血凝蛋白H,其特征在于,所述的重组血凝蛋白H为犬瘟热病毒血凝蛋白H的截短蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.编码权利要求1所述的犬瘟热病毒重组血凝蛋白H的核苷酸序列。
3.如权利要求2所述的核苷酸序列,其特征在于,所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种重组表达载体,其特征在于,含有权利要求2或3所述的核苷酸序列。
5.权利要求1所述的犬瘟热病毒重组血凝蛋白H在制备检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的试剂中的用途。
6.一种用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球,其特征在于,其制备方法包括以下步骤:取1 mL pH5.0醋酸盐缓冲液,加入浓度为300 μg/mL纯化后的权利要求1所述的重组血凝蛋白H 1mL、浓度为5% w/v的羧化聚苯乙烯纳米微球25 μL、200 mg的EDC,漩涡混匀,室温下轻微振荡2h;将充分混合的液体离心弃去上清液;加等渗溶液使球体重新混悬,重复洗一次,最后加入等渗溶液得到混悬液,即得;所述的等渗溶液为0.1mol/LpH6.8的吗啉乙磺酸缓冲液(MES);所述的聚苯乙烯纳米微球为410 nm的彩色聚苯乙烯纳米微球。
7.权利要求6所述的致敏聚苯乙烯纳米微球在制备通过间接凝集反应检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的试剂中的用途。
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