[发明专利]一种养血清脑水提浸膏中毛蕊花糖苷的测定方法

权利要求书

1.一种养血清脑水提浸膏中毛蕊花糖苷的测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)对照品制备方法：称取毛蕊花糖苷对照品，加甲醇配制成标准对照溶液；

2)供试品溶液的制备方法：称取养血清脑水提浸膏，加甲醇溶解，上固相萃取柱，先用25％甲醇洗涤，弃去，再用40％甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，用40％甲醇定容；其中，固相萃取柱为ProElut C18-U型或Sep-Pak Vac C18型固相萃取柱；

3)测定方法：分别取对照品溶液和供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图，根据峰面积使用外标法计算供试品溶液毛蕊花糖苷含量，经换算得到养血清脑水提浸膏中毛蕊花糖苷的含量；

其中的色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱，流动相：以0.3-0.4％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，洗脱方法：梯度洗脱，检测波长：300-350nm；其中，梯度洗脱如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)对照品制备方法中，加甲醇配制成每毫升含毛蕊花糖苷为0.002-0.006mg的溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)供试品溶液的制备方法中：称取养血清脑水提浸膏0.20-0.30g，加15-35％甲醇10ml，溶解。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)供试品溶液的制备方法中：上固相萃取柱，先用25％甲醇5ml洗涤，弃去，再用40％甲醇溶液5mL洗脱，收集洗脱液，加40％甲醇至5ml。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2供试品溶液的制备方法中：固相萃取柱规格为500mg/6mL。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)测定方法，分别取对照品溶液和供试品溶液1-10ul，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)对照品制备方法：称取毛蕊花糖苷对照品适量，加甲醇配制成每毫升含毛蕊花糖苷为0.002-0.006mg的溶液，既得；

2)供试品溶液的制备方法：精密称取养血清脑水提浸膏0.20-0.30g，加15-35％甲醇10ml，超声溶解，摇匀，上至固相萃取柱，用25％甲醇5ml洗涤，弃去，用40％甲醇溶液5mL洗脱，收集洗脱液，加40％甲醇至5ml，摇匀，既得；

3)测定方法：分别取对照品溶液和供试品溶液各2ul，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图，根据峰面积使用外标法计算供试品溶液毛蕊花糖苷含量，经换算得到养血清脑水提浸膏中毛蕊花糖苷的含量；

其中色谱条件如下：

C18色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C18色谱柱；

梯度洗脱表如下：

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)对照品制备方法：称取毛蕊花糖苷对照品适量，加甲醇配制成每毫升含毛蕊花糖苷为0.004mg的溶液，既得；

2)供试品溶液的制备方法：精密称取养血清脑水提浸膏约0.25g，加25％甲醇约10ml，超声溶解，摇匀，上至固相萃取柱，用25％甲醇5ml洗涤，弃去，用40％甲醇溶液5mL洗脱，收集洗脱液，加40％甲醇至5ml，摇匀，既得；

3)测定方法：分别取对照品溶液和供试品溶液各2ul，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图，根据峰面积使用外标法计算供试品溶液毛蕊花糖苷含量，经换算得到养血清脑水提浸膏中毛蕊花糖苷的含量；

色谱条件：C18色谱柱，以0.2％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱，检测波长：334nm，梯度洗脱如下：