[发明专利]一株能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病且具有促生作用的格拉纳达假单胞菌及其应用

说明书

本发明公开了一株能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病且具有促生作用的格拉纳达假单胞菌及其应用，所述的格拉纳达假单胞菌为格拉纳达假单胞菌(Pseudomonas granadensis)PF3402，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：武汉市武昌珞珈山，保藏编号：CCTCC M 2018545，保藏日期：2018年08月17日。本发明通过平板对峙抑菌、防病和盆栽促生实验，首次从阿尔山上的土壤中筛选出能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病的生防菌PF3402，经鉴定该菌株为格拉纳达假单胞菌，同时该菌株还具有促进烟苗生长的作用。试验表明，本发明的PF3402对烟草黑胫病和根黑腐病的病原菌均具有良好的抑制作用，对两种烟草病害的防效均能达到60％以上。

技术领域

本发明涉及一株能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病且具有促生作用的格拉纳达假单胞菌、筛选方法及其应用，属于微生物技术领域。

背景技术

烟草是我国主要经济作物之一，是植烟地区收入的重要来源，现已发现其具有较大的药用和保健价值，且能够作为生物科学最佳的模式材料。但烟草病害制约着烟草的健康生长，尤其是烟草黑胫病、烟草根黑腐病等土传病害的发生会造成烟草减产，发病严重时会造成毁灭性的损失。

烟草黑胫病是烟草生产上危害最严重的土传病害之一，病原物为烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)。该病害多发生于大田成株期，症状主要有“黑胫”、“穿大褂”、“黑膏药”、“碟片状”、“腰烂”，烟草黑胫病属高温高湿型病害，相对湿度高时田间会出现发病高峰，严重时能够造成整株成片死亡。

烟草根黑腐病是世界性的烟草病害，也是我国烟草主要病害之一，其病原物为根串珠霉菌(Thielaviopsis basicola)。根黑腐病主要发生在烟草根部，幼苗染病时可引起“猝倒”，使整株烟苗毁坏；较大烟株染病则病株叶片变黄、变薄，极大的影响烟草产量和品质，严重发生时可导致烟田绝收。

随着国内烟草种植面积扩大，连作烟田的增多，烟草黑胫病和烟草根黑腐病等土传病害的危害不断加重，在部分烟区已成为影响烟草发展的主要病害。生产上烟田防治土传病害多以化学防治为主，农药的长期使用容易产生环境污染、农药残留和耐药病原菌等问题。

生物防治在烟草土传病害控制方面已经受到学者的重视，有关烟草黑胫病和根黑腐病生防菌的筛选及其菌剂和应用已被广泛研究。我国已公开的对烟草黑胫病有效的生防菌株主要有枯草芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌、短短芽孢杆菌、青霉菌和淡紫拟青霉等几类，而对烟草根黑腐病有效的生防菌较少，且能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病这两种容易混合发生的生防菌株则更少，因此筛选对这两种病害同时有效且对烟草有促生作用的生防菌株具有重要的理论和实践意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一株能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病且具有促生作用的格拉纳达假单胞菌、筛选方法和应用，该格拉纳达假单胞菌能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病，且能促进烟苗生长。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一株能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病且具有促生作用的格拉纳达假单胞菌，所述的格拉纳达假单胞菌为格拉纳达假单胞菌(Pseudomonas granadensis)PF3402，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：武汉市武昌珞珈山，保藏编号：CCTCC NO：M2018545，保藏日期：2018年08月17日。

一种能够同时防治烟草黑胫病和根黑腐病且具有促生作用的格拉纳达假单胞菌的筛选方法，采集内蒙古阿尔山上的土壤，称取1g土壤，加入10ml无菌水中充分振荡获得土壤悬浮液，然后将土壤悬浮液摇匀后进行稀释，取0.1ml稀释液涂布于含8-羟基喹啉的KB固体平板上，28℃培养，至菌落长出后分离纯化，然后筛选出对烟草疫霉和根串珠霉具有抑制效果的菌株，并鉴定，得到格拉纳达假单胞菌PF3402。

一种格拉纳达假单胞菌在同时防治烟草黑胫病和根黑腐病方面的应用。