[发明专利]新型红色荧光纳米神经示踪剂在审
| 申请号： | 201811149315.7 | 申请日： | 2018-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN109293754A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 周南;张春霖;严旭;刘小康;张翼;李宇;王文刚 | 申请（专利权）人： | 郑州大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C07K14/28 | 分类号： | C07K14/28;C07K1/13;C09K11/02 |
| 代理公司： | 成都瑞创华盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51270 | 代理人： | 邓瑞;辜强 |
| 地址： | 450001 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 神经示踪 红色荧光 示踪剂 霍乱毒素B亚基 免疫组化染色 步骤简化 技术操作 理化性质 量子点 羧酸化 摄取 荧光 制备 神经 | ||
1.新型红色荧光纳米神经示踪剂，其特征在于：其结构式如下：
R1为羧基化量子点；
R2为霍乱B亚基。
2.新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：
制作步骤如下：
S1.用硼酸盐溶液将羧基化量子点按体积份1:8进行稀释，得到溶液一；
S2.将霍乱毒素B亚基冻干粉溶解于去离子水中，调整浓度为1mg/mL，得到溶液二；
S3.将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶解于去离子水中，调整浓度为3.834mg/mL，得到溶液三；
S4.将N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶解于去离子水中，调整浓度为2.300mg/mL，得到溶液四；
S5.按1:1体积份比例向溶液一中加入溶液三，在20℃～30℃下搅拌混合5分钟，然后加入1体积份的溶液四，继续搅拌30分钟，得到溶液五；
S6.按1:1体积份比例向溶液五中加入溶液二，在20℃～30℃下搅拌混合4小时；
S7.搅拌完成后，用针头过滤器过滤；
S8.滤液用离心超滤管离心过滤5～10次，保留离心液；
S9.离心液再次用针头过滤器过滤。
3.根据权利要求2所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：所述的羧基化量子点采用ITKTM公司的型号为Q21301MP的产品。
4.根据权利要求3所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：采用Thermo Fisher的检测仪检测，设定发射光波长为605nm。
5.根据权利要求2所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：所述的霍乱毒素B亚基采用SIGMA公司的型号为SAE0069的产品。
6.根据权利要求2所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：所述的针头过滤器的膜孔径为0.2μm。
7.根据权利要求2所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂，其特征在于：所述的离心超滤管的规格为100kDa。
8.根据权利要求2所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：离心前用浓度为50mmol/L，pH为8.3的硼酸盐湿润。
9.根据权利要求2所述的新型红色荧光纳米神经示踪剂的制备方法，其特征在于：每次离心的溶液体积为原溶液的10～20倍。
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