[发明专利]一种心肌肌钙蛋白I的检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种心肌肌钙蛋白I的检测试剂盒及其制备方法。本发明公开的心肌肌钙蛋白I的检测试剂盒包括检测抗体以及示踪物标记的捕获抗体，所述捕获抗体为分别结合心肌肌钙蛋白I不同位点的两种单克隆抗体，所述检测抗体为心肌肌钙蛋白I的多克隆抗体。本发明通过筛选合适的心肌肌钙蛋白I免疫层析检测的捕获抗体、检测抗体及其组合，同时优化试剂盒的稀释液组分，显著提升了检测的灵敏度和线性范围，同时保证了准确性和精密度，可用于心肌肌钙蛋白I的高效检测。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，具体涉及一种心肌肌钙蛋白I的检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

心肌肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I，cTnI)是心肌肌钙蛋白的亚单位，存在于心肌肌原纤维细肌丝上，是心肌细胞特有的结构蛋白。在正常情况下，血液中的cTnI含量很低，当发生心肌损伤时，cTnI迅速释放入血液中，致使血液中的cTnI含量增高。心肌细胞损伤3小时～5小时，外周血中出现cTnI升高，12小时～24小时达峰值，持续时间长，可达5天～8天,10天左右基本恢复正常。心肌肌钙蛋白I可作为急性心肌梗死(AMI)的临床辅助诊断，急性冠状动脉综合征(ACS)近期危险分级、预后评估及动态监测的指标。

cTnI常用的检测方法有ELISA法、化学发光法、免疫层析法等。ELISA方法检测周期长；化学发光法价格昂贵，需有专门仪器和专业人员操作，只适用于中心实验室使用，检测周期较长，不能满足临床快速检测的需要，也不适用于中小医院尤其是没有中心实验室的社区医院与乡镇医院；而荧光免疫层析法能够对急诊样本实现快速定量检测。

目前，现有技术中关于心肌肌钙蛋白I免疫层析测定方法存在灵敏度较低、检测的浓度范围较小等问题，因此，开发高效的心肌肌钙蛋白检测试剂和检测方法具有重要意义。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种心肌肌钙蛋白I的检测试剂盒及其制备方法。

本发明提供一种心肌肌钙蛋白I的检测试剂盒，所述试剂盒包括检测抗体以及示踪物标记的捕获抗体，所述捕获抗体为分别结合心肌肌钙蛋白I不同位点的两种单克隆抗体，所述检测抗体为心肌肌钙蛋白I的多克隆抗体。

具体地，本发明所述的捕获抗体为与心肌肌钙蛋白I的结合位点分别为如SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列的41-49位、83-93位和190-196位中的任意两种单克隆抗体。

优选地，所述捕获抗体的两种单克隆抗体与心肌肌钙蛋白I的结合位点分别为如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的41-49位和83-93位。

本发明所述的心肌肌钙蛋白I的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明所述的单克隆抗体与心肌肌钙蛋白I的结合位点均以如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列为依据计算。

本发明所述的单克隆抗体和多克隆抗体可以为市售的抗体或采用本领域抗体制备的常规手段制备得到的单克隆抗体或多克隆抗体。

本发明所述的示踪物为荧光微球。

所述荧光微球的荧光物质包括但不限于稀土元素、荧光素、半导体量子点、碳量子点。

优选地，所述荧光微球掺杂稀土镧系元素中的一种或多种，所述荧光微球的粒径为100～300nm。

所述稀土镧系元素包括但不限于铕(Eu)、钐(Sm)、铒(Er)、钕(Nd)。

作为本发明的优选实施方式，所述荧光微球掺杂有稀土镧系元素铕(Eu)作为荧光物质；所述荧光微球粒径为150nm～200nm。

本发明所述的荧光微球修饰有氨基或羧基，优选为羧基修饰。

本发明所述的荧光微球可以为市售或利用本领域常规技术手段制备得到的荧光微球。