[发明专利]一种LRFF细胞的构建方法在审
| 申请号： | 201811153227.4 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109136268A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 焦顺昌;张嵘;张天赋;周子珊;解佳森;王海燕;吴子明 | 申请（专利权）人： | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭晓迪 |
| 地址： | 100096 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 外周血 多肽 构建 筛选 抗原表位预测 治疗实体肿瘤 慢病毒载体 外显子测序 表达基因 杀伤能力 突变多肽 突变位点 肿瘤细胞 肿瘤组织 个体化 慢病毒 测序 体外 转染 改造 合成 刺激 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种LRFF细胞的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：1)使用人源外周血进行ctDNA测序或肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点；2)根据突变位点进行抗原表位预测，合成突变多肽的基因序列；3)构建表达突变多肽的慢病毒载体，包装慢病毒；4)转染抗原递呈细胞并与PBMC共培养，获得LFF细胞；4)所述突变多肽作为抗原刺激所述LFF细胞，筛选出有效的精准多肽；5)以所述精准多肽作为抗原再次刺激所述LFF细胞，筛选出能够识别所述精准多肽的特异性细胞，即得LRFF细胞。
2.如权利要求1所述的LRFF细胞的构建方法，其特征在于，所述人源外周血也可以是市售工程细胞系。
3.如权利要求1所述的LRFF细胞的构建方法，其特征在于，所述抗原表位预测是以突变的氨基酸位点为中心，向两侧各延伸8个氨基酸，将这段17个氨基酸的多肽作为潜在抗原表位；使用预测软件分析潜在抗原表位的IC50，如IC50＜1000nM则认为此潜在抗原表位为抗原表位。
4.如权利要求1所述的LRFF细胞的构建方法，其特征在于，所述抗原递呈细胞包括：外周血单个核细胞、树突状细胞、中性粒细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京鼎成肽源生物技术有限公司，未经北京鼎成肽源生物技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811153227.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
