[发明专利]一种猪用疫苗稀释液的制备方法

说明书

本发明提供了一种猪用疫苗稀释液的制备方法，属于生物医药技术领域，包括：将猪脾脏、猪小肠和水混合后进行匀浆，将得到的匀浆液反复冻融，将得到的冻融液与乙酸混合后依次进行搅拌、离心，将得到的离心清液与β‑丙内酯混合后灭活，将得到的灭活液在35～42℃下进行水解1～3h，将得到水解液进行切向流微滤，调节得到的微滤液的pH值，将得到的调节液进行切向流超滤，将得到的超滤液除菌，得到猪用疫苗稀释液。本发明提供的制备方法制备得到的猪用疫苗稀释液能够完全杀灭猪用疫苗的无特定病原菌，能够保证疫苗的使用安全。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种猪用疫苗稀释液的制备方法。

背景技术

疫苗是指用各类病原微生物制作的用于预防接种的生物制品，免疫接种的目的是诱发机体产生对接种抗原强大的免疫反应，以保护机体免受相应病原体的侵袭。当今疫苗的使用是非常普及的，不论是人还是畜禽都需要接种疫苗，来预防某些疾病。目前，市面上的疫苗虽有使用转移因子稀释液进行疫苗的稀释，但是在一些猪疫苗用转移因子稀释液稀释后，却不能做到完全无菌。

发明内容

本发明的目的在于提供一种猪用疫苗稀释液的制备方法，采用本发明提供的制备方法制备得到的稀释液，稀释疫苗后，使得完全无菌。

本发明提供了一种猪用疫苗稀释液的制备方法，包括以下步骤：

1)将猪脾脏、猪小肠和水混合后进行匀浆，得到匀浆液；

2)将步骤1)所述的匀浆液反复冻融6～8次，得到冻融液；

3)将步骤2)所述的冻融液与乙酸混合后依次进行搅拌、离心，将得到的离心清液与β-丙内酯混合后灭活，得到灭活液；

4)将步骤3)所述的灭活液在35～42℃下进行水解1～3h，得到水解液；

5)将步骤4)所述的水解液进行切向流微滤，调节得到的微滤液的pH值为6.5～7.5，得到调节液；

6)将步骤5)所述的调节液进行切向流超滤，将得到的超滤液除菌，得到猪用疫苗稀释液。

优选的，所述步骤1)猪脾脏的质量与猪小肠的质量、水的体积比为(0.5～1.5):(0.1～0.3):(0.8～1.5)。

优选的，所述步骤1)匀浆的速度为8000～12000rpm，所述匀浆的时间为10～20min。

优选的，所述步骤3)冻融液与乙酸混合后，乙酸的终浓度为1～3％。

优选的，所述步骤3)搅拌的温度为0～10℃，所述搅拌的时间为10～14h，所述搅拌的速度为30～50rpm。

优选的，所述步骤3)离心的温度为0～4℃，所述离心的时间为10～20min，所述离心的速度为5000～10000rpm。

优选的，所述步骤3)离心清液与β-丙内酯混合后，β-丙内酯的终浓度为0.010～0.015％。

优选的，所述步骤3)灭活的温度为5～15℃，所述灭活的时间为24～30h。

优选的，所述步骤5)切向流微滤使用的滤膜的孔径为0.22μm。

优选的，所述步骤6)切向流超滤使用的超滤膜的分子量为4～8kD。

本发明提供的猪用疫苗稀释液的制备方法制备得到的稀释液中含有猪小肠抗菌肽和转移因子，猪小肠抗菌肽结合转移因子，能够完全杀灭疫苗内的无特定病原菌，从而保证疫苗使用的安全。

本发明实施例的结果显示：本发明提供的制备方法制备得到的猪用疫苗稀释液能够完全杀灭猪用疫苗的无特定病原菌，能够保证疫苗的使用安全。

具体实施方式