[发明专利]一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用

权利要求书

1.一种动态键水凝胶在酶固定化方面的应用，其特征在于，具体应用方法如下：

步骤一、制备浓度为50-200mM的6-氧-羧甲基壳聚糖溶液100-300μL，加入0.01-1.0mg靶点酶，并分散均匀，进一步加入100-400μL步骤2)所得动态键聚合物溶液，20-60℃静置0.5-6小时，得到动态键水凝胶包裹的固定化酶；

步骤二、将固定化酶置于酶催化反应体系，加入酶的底物、溶液、辅助因子，观察产物生成情况，检测酶催化反应速率；与同等条件的自由酶催化比较，动态键水凝胶载体不仅能维持酶的活性，而且能够提高酶的重复可利用性。

2.根据权利要求1所述的一种动态键水凝胶在酶固定化方面的应用，其特征在于，所述动态键水凝胶的制备方法步骤如下：

1)将芳香醛、氨基封端的聚合物以及含功能基团的胺在有机溶剂中混合，在60-80℃回流3-4天，进行亚胺生成反应；其中，芳香醛与氨基封端的聚合物的摩尔量之比为1:2～4:1；芳香醛与含功能基团的胺的摩尔量之比1:4～3:1；

2)用减压蒸馏去除步骤1)中亚胺生成反应后体系中的溶剂，并加入蒸馏水，制备得到浓度为10-20mM的动态键聚合物溶液。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，动态键聚合物的制备方法中，所述的芳香醛为均苯三甲醛、邻苯二甲醛、对苯二甲醛或间苯二甲醛。

4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，动态键聚合物的制备方法中，所述的氨基封端的聚合物为氨基封端的聚乙二醇、聚醚胺、聚四氢呋喃、壳聚糖或氨基修饰的透明质酸。

5.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，动态键聚合物的制备方法中，所述的含功能基团的胺包含1～3个伯胺、嵌有0-5个相同或不同的烷氧基、酰胺基、羟基亚甲基或仲胺基功能基团的烃链，烃链的碳数为2-12；结构式依次为(a)、(b)、(c)和(d)：

其中，X为碳数2-12的、嵌有0-5个相同或不同的烷氧基、酰胺基、羟基亚甲基或仲胺基在内的功能基团的烃链。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，动态键聚合物的制备方法中，所述的含功能基团的胺包含1～3个伯胺、嵌有0-5个相同或不同的烷氧基、酰胺基、羟基亚甲基或仲胺基功能基团的烃链，烃链的碳数为2-12；结构式依次为(a)、(b)、(c)和(d)：

其中，X为碳数2-12的、嵌有0-5个相同或不同的烷氧基、酰胺基、羟基亚甲基或仲胺基在内的功能基团的烃链。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，动态键聚合物的制备方法中，所述的氨基封端的聚合物为双(3-氨基丙基)聚乙二醇、聚醚胺D系列、双端(3-氨丙基)聚四氢呋喃、双端氨基封端的长链烷烃、四臂-聚乙二醇-氨基、聚醚胺T系列或聚醚胺ED系列，具体结构式分别为(A)～(G)：