[发明专利]一种提取微生物油脂的方法

说明书

本发明提供一种提取微生物油脂的方法，通过低温连续提取的方法，避免高温消耗油脂，能耗低，并结合pH的梯度变化等技术参数的调整，实现粘红酵母优质的高质量提取。采用本发明方法微生物油脂的提取率最高达到98.4％，所得微生物油脂中杂质含量可低至0，不皂化物含量低至0.2％，油脂质量佳。

技术领域

本发明涉及油脂提取技术领域，特别涉及提取微生物油脂的方法。

背景技术

目前制备生物柴油主要利用的是植物油或餐饮废弃物中提取的油脂，植物油原料生产成本高，二餐饮废弃物收集不便，集中生产具有一定的困难。微生物繁殖及代谢周期短且油脂含量高，与植物油相比，不占用耕地，可连续生产，不受气候及季节影响。其作为替代油源对环境友好，可再生性强，是各国技术人员的研究热点。

产油微生物因其自身的一系列优势被认为是最有前景的生产生物柴油的替代能源。就粘红酵母而言，其生长周期短，油脂含量丰富，一般可以达到细胞干重的40％～70％，单位面积的产油量可高出大豆等油料作物数十倍。

尽管如此，成本较高仍是微生物油脂产业实现工业化的瓶颈，这其中，油脂的提取成本约占总成本的50％。目前，微生物油脂提取技术有机械法、酶法及有机溶剂法。机械法存在油脂提取率偏低、能耗偏高的问题；酶法虽然高效且环境友好，但成本过高阻碍了其进一步的应用；有机溶剂法通常采用氯仿、甲醇、乙醚等从产油微生物中提取油脂，有机溶剂用量大、提取时间长、环境友好性差，工业化应用受限。

CN104531342A公开了一种提取微生物油脂的方法，包括以下步骤：(1)将发酵后的产油微生物通过分离系统，得到含水量为65％～90％的湿菌体；(2)向步骤(1)的湿菌体中加入正己烷和乙醇的混合溶剂，恒温提取一段时间，然后进行固液分离，得到含油混合溶剂a和菌粕；(3)向步骤(2)所得菌粕中加入正己烷和一定浓度的乙醇，恒温提取一段时间，再次固液分离后收集含油混合溶剂b和菌粕；(4)合并上述含油混合溶剂a和b；然后脱溶得到微生物油脂。该方法中采用的正己烷仍然具有一定的低毒性，产品杂质含量较多，且经过多次的固液分离导致油脂的损耗，此外操作较为繁琐，在推广应用方案存在一定的局限性。

发明内容

鉴以此，本发明提供了一种提取微生物油脂的新方法。

本发明的技术方案是：

一种提取微生物油脂的方法，包括以下步骤：

(1)取粘红酵母的湿菌体，加入质量百分浓度为70～85％的乙醇水溶液，调节pH8.0～8.4，5～10℃震荡提取1～1.5h，并于5～10min内将温度提高至25～30℃后保持20～30min；

(2)加入异丙醇乙醇混合溶液，15～20℃震荡提取10～30min；加入0.5～1倍体积乙醇，调节pH 3.0～5.5，连续搅拌15～20min；其中，异丙醇乙醇混合溶液的加入量为步骤(1)所得料液总体积的2～3倍；

(3)加入四氢呋喃，调节pH 2.0～4.0，-5～0℃震荡提取1～2h后固液分离得到含油混合溶剂；其中，四氢呋喃的加入量为步骤(2)所得料液总体积的2～3倍；

(4)在不高于50℃的温度条件下真空脱溶，然后常规脱色、脱臭处理，得微生物油脂。

优选的，步骤(2)中，pH为3.5。

优选的，步骤(2)中，异丙醇乙醇混合溶液中异丙醇和乙醇的体积比为1:(7～10)。

更优选的，步骤(2)中，异丙醇乙醇混合溶液中异丙醇和乙醇的体积比为1:8。

优选的，步骤(1)中湿菌体与乙醇水溶液的料液比g/mL为1:(3～5)。

更优选的，步骤(1)中湿菌体与乙醇水溶液的料液比g/mL为1:3。

优选的，湿菌体的含水量为50％重量比。