[发明专利]细胞株及其应用、B细胞的培养体系及培养方法和抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201811160609.X | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109234238A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 戴继鸿;詹梦黎;王骄阳;干作飞 | 申请（专利权）人： | 杭州华安单抗生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C07K16/00;C12N5/0781 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李青 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市江干区杭州经济技术*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 培养体系 细胞株 抗体 制备 应用 生物技术领域 记忆B细胞 保藏 抗体类型 稳定表达 重要因子 体外 兔源 增殖 存活 发育 转换 生产 | ||
1.一种细胞株，其特征在于，所述细胞株的保藏号为CCTCC NO：C2018180。
2.权利要求1所述的细胞株的应用，其特征在于，所述应用包含如下(x1)-(x7)中的至少一种：
(x1)制备饲养细胞；
(x2)培养B细胞；
(x3)制备抗体；
(x4)构建兔源免疫模型；
(x5)作为筛选抗兔CD40L抗体的筛选细胞；
(x6)噬菌体库；
(x7)高通量测序。
3.一种用于培养B细胞的培养体系，其特征在于，所述培养体系包含权利要求1所述的细胞株。
4.根据权利要求3所述的培养体系，其特征在于，所述培养体系还包括白细胞介素；
优选地，所述白细胞介素包括IL-4、IL-10和IL-21中的至少一种；
优选地，所述IL-4的终浓度为10-25ng/mL；
优选地，所述IL-10的终浓度为5-20ng/mL；
优选地，所述IL-21的终浓度为5-20ng/mL。
5.根据权利要求3所述的培养体系，其特征在于，所述培养体系还包括丝裂原；
优选地，所述丝裂原包括脂多糖、美洲商陆丝裂原和葡萄酒菌蛋白A中的一种或多种；优选包括美洲商陆丝裂原；
优选地，述美洲商陆丝裂原的终浓度为5-10μg/mL；优选为5.5-9μg/mL；更优选为6-8μg/mL。
6.一种B细胞的培养方法，其特征在于，包括：使用权利要求1所述的细胞株与B细胞共培养，或使用权利要求2-5中任一项所述的培养体系培养B细胞。
7.根据权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述B细胞为兔源B细胞；优选为兔外周血B细胞。
8.一种抗体的制备方法，其特征在于，包括：使用权利要求6或7所述的B细胞的培养方法培养表达抗体的B细胞。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，使用抗原体外免疫兔外周血B细胞，得到表达抗体的兔外周血B细胞，再使用所述培养体系培养。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将分离出的兔外周血淋巴细胞在包被有特异性抗原的培养容器中孵育；孵育完毕后消化贴壁细胞，得到抗原特异性的B细胞；
重悬后置于含有所述培养体系的培养容器内进行体外培养。
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