[发明专利]一种羊肚菌还原菌种的制作方法及栽培应用

说明书

一种羊肚菌还原菌种的制作方法及栽培应用，该方法打破传统固体菌种的模式，采用液体菌种制作、菌种和培养基质分离、纯菌种运输、目的地加液体还原菌种的新模式，同时配合还原菌种的液体配方：在1L的蒸馏水中加入酵母粉0.01‑0.05%，K₂HPO₄ 0.03‑0.08%，KH₂PO₄ 0.03‑0.08%，MgSO₄ 0.01‑0.05%，复合维生素溶液0.1%，即可进行大田或者林下喷洒接种。一方面液体栽培种播种过程简单、制作成本低且发菌快，显著地提高了栽培羊肚菌的效率；另一方面经分离后纯菌种体积小，运输方便，菌种与培养基分离，发热量少，有效避免了菌种运输过程中发热烧菌的发生。

技术领域

本发明涉及一种羊肚菌还原菌种的制作方法及栽培应用，属于食用菌制种、栽培技术领域。

背景技术

羊肚菌（Morchella spp.）肉质鲜美脆嫩、营养和药用价值极高，是一种珍贵的食药用菌，深受各国人们喜爱。目前在生产上，通常利用固体栽培种进行接种培养，需要的固体栽培种量大而且菌龄差异大，播种效率低。更加突出的问题在于，羊肚菌菌种活力极其旺盛，又不耐高温，固体菌种由于菌丝体与固体基质混合在一起，菌丝体发热的温度无法有效传导出去，造成烧菌现象的发生，难以满足羊肚菌菌种质量和长途运输的需求。

发明内容

本发明目的在于提供一种羊肚菌还原菌种的制作方法及栽培应用。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种羊肚菌还原菌种的制作方法，包括下列步骤：

第一步：将羊肚菌母种转接到一容纳有PDA培养基的平板上进行活化，使羊肚菌母种的菌丝活力恢复，然后分割得到羊肚菌原种PDA菌块；

第二步：将所述羊肚菌原种PDA菌块接种到灭菌后的PDB液体培养基，在20-25℃条件下，用摇床培养箱于暗处培养5-7天，得到羊肚菌一级种；

第三步：将所述羊肚菌一级种接种到容纳有羊肚菌液体栽培种培养基的发酵罐中，接着，将接种后的发酵罐以20-25℃培养5-7天；所述羊肚菌液体栽培种培养基的制备方法为：向1升蒸馏水加入其质量1.0-2.0%的蔗糖，0.10-0.50%的蛋白粉、0.20-0.30%的酵母粉，0.6-0.7%的豆粕粉，0.05-0.10%的K₂HPO₄，0.05-0.20%的KH₂PO₄和0.05-0.10%的MgSO₄，混合均匀后调节pH值至6.3-6.8，再经灭菌、冷却步骤后制得；

第四步：利用真空抽滤机对第三步培养得到的羊肚菌液体菌种进行浓缩，即得羊肚菌纯栽培菌种；

第五步：将羊肚菌纯菌种用无菌自封袋分装，然后在4-8℃条件下进行保藏和运输；

第六步：运输到目的地后，将所述羊肚菌纯菌种与菌种还原液按照1：0.9-1.1的体积比加入粉碎机，搅拌粉碎后再加入羊肚菌纯菌种体积8-10倍的菌种还原液，得到羊肚菌还原菌种。

优选的技术方案为：所述菌种还原液的制备方法为：在1L的蒸馏水中加入其质量0.01-0.05%的酵母粉，0.03-0.08%的K₂HPO₄，0.03-0.08%的KH₂PO₄，0.01-0.05%的MgSO₄，0.8-1.2%的复合维生素溶液。

优选的技术方案为：所述复合维生素溶液由1g盐酸硫胺素和0.1g核黄素溶于水中，定容至1L后，于104℃灭菌30分钟，再于70℃保温2小时，冷却后制得。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种羊肚菌还原菌种的栽培应用，将上述方法制得的羊肚菌还原菌种，用喷洒设备对待接种的大田或者林下进行喷洒。