[发明专利]一种高效获取双孢蘑菇担孢子同核体的方法

说明书

本发明公开一种高效获取双孢蘑菇担孢子同核体的方法，所述方法包括如下：步骤（1）：蘑菇种植双孢蘑菇挑选种类并在蘑菇种植设施中种植培育试样，步骤（2）：取样在双胞蘑菇采摘阶段，按时间先后划分为内菌幕未现期，内菌幕初现期，内菌幕内凹期，内菌幕平坦期，内菌幕裂缝期五个发育阶段进行蘑菇取样。步骤（3）：分析挑取不同发育阶段蘑菇的菌褶，统计不同发育阶段菌褶上发育出孢子梗的担子数量及不同担子的比例。步骤（4）：确定最佳获取时期根据步骤（3）结果确定至少一个发育阶段为最佳获取时期。步骤（5）：大批量采取担孢子同核体。本发明利用蘑菇处于内菌幕初现期，来获取双孢蘑菇担孢子同核体，能够大大提高获取的效率。

技术领域

本发明涉及蘑菇栽培育种和改良技术领域，具体涉及高效获取双孢蘑菇担孢子同核体的方法。

背景技术

双孢蘑菇Agaricus bisporus (Lange ) Sing，又称双孢菇、洋菇(台湾)。它在分类学上隶属于真菌门(Eumycota)、担子菌纲(Basidiomycetes)、伞菌目(Agaricales)、蘑菇科(黑伞科)(Agaricaceae)、蘑菇属(黑伞属)(Agaricus)。

双孢蘑菇（Agaricus bisporus）是世界上人工栽培最广泛、产量最高、消费量最大的食用菌，具有重要的经济价值。我国自20世纪30年代引入栽培以来，已在全国各地推广种植，其中种植面积较多的有福建、山东、河南和浙江等省。双孢蘑菇是具有不同交配类型生活史的不同自然居群的物种,它分别具有次级同宗配合的交配类型-生活史,异宗配合的交配类型-生活史,以及同时具有次级同宗配合和异宗配合的双重生活史。这3种生活史主要依据其担子产生担孢子的数量和担孢子的核型是同核体还是异核体来划分。

现在人们所栽培的全部品种,以及绝大部分野生居群都有属于双孢蘑菇原变种生活史，这一变种,它包括99%的法国野生居群,加拿大Alberta居群,加利福尼亚海滨居群,英国,以色列,荷兰等居群。这一变种的特征是子实体的每个担子几乎都只产生2个担孢子,且担子核减数分裂后形成的四个子核,不是随机地分别成对进入两个担子,而是非姊妹核配成一对进入一个担孢子,这样产生的担孢子都是异核体,孢子萌发形成异核体菌落,所以这个变种主要行次级同宗配合的交配类型生活史，Elliott对双孢蘑菇担子种类的统计结果为双孢担子产生概率为95%，三孢担子产生概率为4.5%，四孢担子产生概率为0.5%。1972年Raper,Elliott等人对双孢蘑菇生活史进行了详细的研究，并利用遗传标记作分析的工具，揭示了蘑菇杂交育种存在两个障碍:一是它具有独特的遗传特性，使担子上的两个孢子大多具有异核而自身可育;二是它的同核体与异核体间没有形态上的差异，即异核体也无锁状联合现象并且由于世界双孢蘑菇野生资源分缺乏，给双孢蘑菇菌种改良和选育工作带来了相当大的困难。

目前双孢蘑菇同核体获得方法有原生质体法、单孢分离法。单孢子分离法通过观察分离的担子生长速度和形态挑选出单孢同核体，由于同核体数量稀少，据统计同核孢子约占孢子总数的5.6%，因此单孢分离耗时费力。现有技术缺乏一种能够高效获取效获取双孢蘑菇担孢子同核体的方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明根据双孢蘑菇不同发育时期的同核率不同，通过对发育时期的选择，来获取双孢蘑菇担孢子，可有效提高同核体孢子获取效率。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种高效获取双孢蘑菇担孢子同核体的方法，所述方法包括如下：

步骤（1）：蘑菇种植

双孢蘑菇挑选种类并在蘑菇种植设施中种植培育试样。上述种植设施为常规蘑菇种植设施。

步骤（2）：取样

在双胞蘑菇采摘阶段，按时间先后划分为内菌幕未现期，内菌幕初现期，内菌幕内凹期，内菌幕平坦期，内菌幕裂缝期五个发育阶段进行蘑菇取样。

步骤（3）：分析