[发明专利]利用高效液相色谱鉴别金银花和山银花的方法

说明书

本发明公开了一种利用高效液相色谱鉴别金银花和山银花的方法，其特征在于，当待测物为金银花或山银花中的一种或两种时，通过高效液相色谱检测待测物干燥品中断马钱子酸的重量百分比来鉴别金银花和山银花，当测待测物干燥品中断马钱子酸含量小于1.5％，判定为非金银花；断马钱子酸含量大于1.0％，判定为非山银花。断马钱子酸含量小于等于1.5％，且大于等于1.0％时，判定为金银花或山银花的混合物。本发明通过高效液相色谱检测金银花和山银花干燥品中断马钱子酸的重量百分比来鉴别金银花和山银花，快捷、准确，为药品的生产、流通、使用过程中提供了一种鉴别真假的依据。

技术领域

本发明属于中药材来源品种鉴定技术领域，涉及一种鉴别金银花和山银花的方法，具体涉及一种利用高效液相色谱鉴别金银花和山银花的方法。

背景技术

金银花和山银花自2005版《中华人民共和国药典》起分列为两种药材。由于二者原植物种属相近、药材外观形态相似，难以区分，因此市场上金银花和山银花药材来源不清、品种混乱，因为山银花产量大，价格低，市场上经常存在山银花冒充金银花现象，然而两者的物质基础相差较大，从而直接影响到药材及其制剂的疗效，更严重的是山银花中皂苷含量比金银花多，而皂苷可以导致注射剂的溶血现象，直接危害用药者的生命安全。

用传统方法可将金银花及山银花同其他药材分开，但是现有的用于金银花与山银花两者之间的品种鉴别方法均存在一些不足之处。如传统的外观形态鉴别依赖经验、主观性大，尤其是对于市场上两者混合品或粉碎状态无法鉴别；DNA分子鉴定法技术复杂、环境为万级实验，要求高，成本高，检验周期长，影响因素多导致重复性差。药理法验证成本高、周期长、影响因素多导致误差大，这些方法虽然可以在一定程度上对近缘品种进行区分，但无法对药效的优劣进行评价。

专利CN 103173532 B(一种鉴别金银花和山银花的方法及其应用)涉及一种鉴别金银花和山银花的方法及其应用。本方法包括PCR扩增ITS2核苷酸序列，包括1)提取样品DNA；2)PCR扩增含有核糖体DNA的ITS2序列的片段；3)对扩增产物进行拼接，获得完整ITS2基因间隔区；4)构建样品的ITS2序列的NJ树。专利CN 104419754 A(一种快速鉴别金银花真伪的方法)公开了一种鉴别金银花及其常见伪品山银花的方法，是利用高分辨率溶解曲线技术对金银花与山银花的标志性核酸位点进行分析。本方法通过对供试金银花样品进行DNA提取、PCR扩增和HRM分析，确认标志性核酸位点分型，进而对金银花真伪进行鉴定。上述方法属于DNA分子鉴定法、需要PCR扩增，技术复杂，成本高。

专利CN 105277721 B(一种鉴别口炎清制剂原料山银花和金银花的方法)公开了一种区分金银花和山银花的鉴别方法，包括以下步骤：以山银花或含山银花原料的制剂为对照；构建急性口腔炎症模型；通过比较供试品和对照标准品对急性口腔炎症模型细胞中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10表达水平的影响，鉴别区分金银花和山银花或其复方制剂。本方法需要山银花或含山银花原料的制剂为对照，构建急性口腔炎症模型；存在检验方法复杂、检验不够快速、成本高、影响因素多、误差大的缺陷。

发明内容

本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种利用高效液相色谱鉴别金银花和山银花的方法。本方法以断马钱子酸为指标，采用液相色谱法进行检测金银花及山银花干燥品中断马钱子酸的重量百分比，来鉴别金银花和山银花。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

利用高效液相色谱鉴别金银花和山银花的方法，当待测物为金银花或山银花中的一种或两种时，通过高效液相色谱检测金银花和山银花干燥品中断马钱子酸的重量百分比来鉴别金银花和山银花。

优选的，上述鉴别方法中，当断马钱子酸含量小于1.5％时，判定为非金银花；断马钱子酸含量大于1.0％，判定为非山银花；当断马钱子酸含量小于等于1.5％，且大于等于1.0％时，判定为金银花或山银花的混合物。