[发明专利]弧菌噬菌体及其杀菌组合物制备方法和应用

说明书

本发明涉及弧菌噬菌体及其杀菌组合物制备方法和应用，属于生物技术领域。该噬菌体组合物包括溶藻弧菌噬菌体vB_ValS_PcR‑1（保藏号CCTCC NO:M 2018391）、哈维氏弧菌噬菌体vB_VhaM_PcB‑1G(保藏号CCTCC NO：M 2018392)及副溶血弧菌噬菌体vB_VhaP_OW（保藏号CCTCC NO：M 2015577），在其宿主作用后可获得高效价培养物，且于室温下稳定性良好，具有裂解宿主范围广，能够高效抑制溶藻弧菌、哈维氏弧菌及副溶血弧菌等主要致病性弧菌的生长，能够作为生物抗菌剂应用于食品及水产养殖中控制弧菌的污染。

技术领域

本发明涉及弧菌噬菌体及其杀菌组合物制备方法及作为抗菌制剂在食品和水产养殖中的抗菌应用，尤其是能够特异性裂解食品及水产养殖中多种弧菌污染。属于生物技术领域。

背景技术

近年来，水产养殖尤其是海产养殖已成提高全球水产品供给量的主要生产方式，随着养殖规模及密度的不断增加，网箱养殖过程中的疾病频繁出现，给规模化养殖的发展带来巨大威胁。针对海产养殖中的鱼类及虾类细菌性疾病研究表明，其主要病原以弧菌属为主，其中以哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)及副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)为主要致病菌，在鱼类主要表现为溃疡病，在虾类则以急性肝胰腺坏死综合征为主，死亡率高达80％，该病的暴发导致养殖业遭受巨大经济损失。目前针对弧菌病的防控和治疗途径仍以抗生素、中药制剂及消毒剂等，然而，由于传统养殖模式的不完善及抗生素使用不规模，造成弧菌出现频繁耐药，且表现多重耐药特征，从而导致抗生素防治失败，海产品中抗生素残留严重，不仅造成经济损失，且严重威胁人类健康。

噬菌体是一类细菌依赖性的病毒，又称细菌病毒。裂解性噬菌体特异性感染细菌后，可在宿主菌内快速增殖，并使之瓦解，故又称毒性噬菌体，例如副溶血弧菌噬菌体能特异性感染并裂解副溶血弧菌，而哈维氏弧菌噬菌体和溶藻弧菌噬菌体则特异性裂解哈维氏弧菌和溶藻弧菌，从而具有高效杀菌、特异且无残留等优点。针对水产养殖中耐药性弧菌防治失败等问题，通过哈维氏弧菌、溶藻弧菌及副溶血弧菌相应的噬菌体进行复合使用，能够同时有效杀灭致病性哈维氏弧菌、溶藻弧菌及副溶血弧菌，从而有效防控因致病性弧菌导致感染甚至死亡。噬菌体能够通过噬菌体-宿主相互识别裂解靶细菌，与抗生素作用方式不同，因此能够有效杀灭多重耐药性弧菌。通过弧菌噬菌体的复配达到高效、广宿主谱系、不产生抗性无残留以及不影响正常菌群等特点，必然是新型抗菌产品的候选。目前噬菌体已在食品及医药行业受到广泛关注，尤其是针对耐药性细菌的不断产生和传播，噬菌体都能够作为抗菌剂来控制细菌感染，具有良好的开发和应用价值。

发明内容

发明目的

开发对弧菌病主要病原哈维氏弧菌、溶藻弧菌及副溶血弧菌具有强裂解作用的噬菌体制剂，该制剂可以单独或复配使用，能够特异性的灭活多种弧菌，为目前防控食品及水产养殖中弧菌污染提供一种安全、无毒副作用的噬菌体产品来源。

技术方案

一种弧菌噬菌体，其特征在于弧菌噬菌体为溶藻弧菌噬菌体vB_ValS_PcR-1(Vibrio alginolyticus phage vB_ValS_PcR-1)保藏号为CCTCC NO:M 2018391，或哈维氏弧菌噬菌体vB_VhaM_PcB-1G(Vibrio harveyi phage vB_VhaM_PcB-1G)保藏号为CCTCCNO：M 2018392。

一种弧菌噬菌体组合物，其特征在于所述该噬菌体组合物包括溶藻弧菌噬菌体CCTCC NO:M 2018391、哈维氏弧菌噬菌体CCTCC NO：M 2018392和副溶血弧菌噬菌体CCTCCNO：M 2015577。

所述的弧菌噬菌体组合物，其特征在于以所述的噬菌体、噬菌体分离物或噬菌体培养物制成组合物。

所述的弧菌噬菌体组合物，其特征在于将所述的噬菌体、噬菌体分离物或噬菌体培养物与赋形剂复配，制成组合物。