[发明专利]一种肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束

权利要求书

1.一种肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束，利用肝癌特异性抗体HAb18F(ab’)2介导阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束进行导向治疗,其特征在于：所属制剂包含阿霉素和聚乳酸-羟基乙酸共聚物。其中聚乳酸-羟基乙酸共聚物为高分子生物载体材料。采用化学方法共价偶联阿霉素(DOX)和乳酸-羟乙酸共聚物(PLGA-PEG)的合成DOX-PLGA-PEG，利用透析法制备DOX-PLGA-PEG纳米胶束。通过HAb18F(ab’)2抗体物理吸附来修饰DOX-PLGA-PEG纳米胶束，制备靶向胶束。

2.肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束具有明显抗肿瘤效果，通过静脉途径给药，能够控释给药，同时兼有被动靶向和主动靶向，可以显著提高疗效。

3.一种按照权利要求1所述的阿霉素抗肝癌纳米制剂，阿霉素来源于生物合成，聚乳酸-羟基乙酸共聚物为人工合成。

4.如权利要求1所述的制备方法：

①DOX-PLGA-PEG合成：PLGA–PEG二嵌段共聚物3g溶解于冰冷(0℃)的二氯甲烷30ml中，然后逐滴加入对硝基苯基氯甲酸酯80mg和吡啶63mg，在室温并通以氮气保护的条件下反应3h以活化PLGA的末端羟基。活化的PLGA–PEG二嵌段共聚物在冰冷乙醚沉淀后收集，沉淀过滤并低压干燥。在室温、氮气保护的条件下，取活化的PLGA–PEG二嵌段共聚物0.25g溶解于二甲基甲酰胺7.5ml中，加入10mg阿霉素和三乙胺6.5mg，避光、持续搅拌24h。将上述反应液加入到去离子水中，透析3次共4h以纯化合成的DOX–PLGA–PEG。冷冻干燥后，DOX–PLGA–PEG干粉置于–20℃保存备用。

②纳米胶束制备：DOX–PLGA–PEG干粉100mg溶解于10ml丙酮，然后加入到100ml磷酸盐缓冲液(PBS，pH 7.4)中过夜，胶束自组装形成，透析除去丙酮和磷酸盐，通过观察透明淡红色溶液和丁达尔现象证实。冷冻干燥后，胶束干粉4℃保存备用。

③抗体修饰胶束：HAb18F(ab’)₂抗体溶于10mM PBS(pH 5.7)，浓度为2mg/ml。胶束分散于去离子水中，浓度为10mg/ml。上述两种溶液体积比1：1混合，室温过夜并适度搅拌以发生吸附反应。混合溶液在4℃离心10min收集，转速为20000rpm，然后用PBS(pH 7.4)洗涤3遍去除未结合抗体。制成的靶向胶束最后重悬于1.0ml PBS(pH 7.4)。