[发明专利]一种屋尘螨过敏原Der p 33基因重组蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种屋尘螨过敏原Der p 33基因重组蛋白及其应用。本发明屋尘螨过敏原Der p 33基因如SEQ ID NO：2所示，该重组蛋白由屋尘螨过敏原Der p 33基因经表达、纯化后得到，序列如SEQ ID NO：1所示。该重组蛋白用于制备精准医学检测屋尘螨引起的过敏性疾病的诊断试剂或生物制品方面。本发明首次发现屋尘螨Der p 33基因序列全长，并通过基因克隆、表达、纯化获得其重组蛋白，该重组蛋白用于Western blotting实验精准医学检测16例屋尘螨引起的过敏性哮喘患儿，阳性率18.75％(3/16)，而对照组无阳性。

技术领域

本发明属于变态反应学领域，尤其涉及一种屋尘螨过敏原Der p 33基因重组蛋白及其在制备精准医学检测屋尘螨引起的过敏性疾病的诊断试剂或生物制品方面的应用。

背景技术

尘螨(House dust mite)泛指灰尘里滋生的所有螨类，按界、目、纲、门、科、属、种进行分类，其种类繁多，常见的为粉尘螨(Dermatophagoides farinae)屋尘螨(D.pteronyssinus)，也是我国大陆最常见的两种螨。根据我国呼吸道过敏性疾病科研及流调协作组(China Alliance of Research on Respiratory Allergic Disease,CARRAD)皮肤点刺试验结果，粉尘螨阳性率为59.0％、屋尘螨阳性率为57.6％，说明这是不同的致敏螨种，其对过敏性疾病实验诊断具有不同的临床价值。

过敏体质者吸入尘螨分泌物、排泄物及尸体的降解产物后可发生Ⅰ型变态反应，引起哮喘、鼻炎及异位性皮炎等多种变态反应性疾病，采用药物治疗可以暂时缓解症状，但是不能根除疾病。大量临床试验表明，采用变应原特异性免疫治疗(allergen-specificimmunotherapy，SIT)具有特异性、持久改善病情等优点。但是，临床采用变应原来源物质制备出的粗提浸液为多种变应原的混合物，不同批次粗提浸液含有的变应原种类不稳定，主要变应原组分的含量不稳定，并可能含有非变应原物质、某些免疫原性偏低的变应原、毒性蛋白等，用于临床治疗会引起局部和全身的不良反应，甚至危及生命。

每种螨均可以产生上千种蛋白，有的是过敏原，有的不是。能够引起尘螨过敏性疾病患者机体内产生特异性IgE抗体、并与过敏性疾病患者血清在体内发生结合的螨虫成份称为过敏原组分(Groups)。系统地鉴定、表征这些组分，对两种螨的临床应用具有重要的价值。

迄今，临床诊断均采用粉尘螨和/或屋尘螨粗提物为抗原建立免疫学检验方法。由于螨体粗提物中含有多种过敏原组分，同一组分在不同批次产品中含量不一致，很难实现产品的标准化。因此，了解每种螨的过敏原组分，制备过敏原单组分生物制品，基于单组分建立检验方法，精准检测过敏性疾病患者是因某种组分或是某些组分致敏，为临床制订精准脱敏治疗方案提供依据。

国际过敏原命名委员会已经命名了粉尘螨过敏原第33组分Der f 33，但是没有公布屋尘螨第33组分Der p 33及其编码基因。粉尘螨过敏原却无法替代屋尘螨过敏原，这是因为，二者即使具有一定的序列相似，但即便只是相差1个氨基酸也会引起临床误诊，更何况是不同物种之间具有相似序列的蛋白质。

发明内容

本发明的目的在于提供一种屋尘螨过敏原Der p 33基因重组蛋白及其应用，该重组蛋白用于精准医学检测屋尘螨引起的过敏性疾病的诊断试剂或生物制品方面，旨在解决现有尘螨引起的过敏性疾病无法得到精准医学检测的问题。

本发明是这样实现的，一种屋尘螨过敏原Der p 33基因重组蛋白，该基因的DNA序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明进一步公开了上述屋尘螨过敏原Der p 33基因重组蛋白在精准医学检测屋尘螨引起过敏性疾病的诊断试剂或生物制品方面的应用。