[发明专利]一种复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱及其构建方法

权利要求书

1.一种复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述的HPLC特征图谱的构建方法包括如下步骤：

(1)制备对照品溶液：称取苦杏仁苷对照品、木犀草苷对照品、罗汉果皂苷V对照品加甲醇溶解，制成每1ml含苦杏仁苷30μg、木犀草苷10μg、罗汉果皂苷V40μg的混合对照品溶液；

(2)制备供试品溶液：取复方罗汉果清肺制剂样品，加碱溶液调pH至中性，采用层析柱分离技术，依次采用水、稀乙醇洗脱，弃去洗脱液，再用体积分数为70％的乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干得到残渣，加甲醇溶解残渣，转移至量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得；

所述的复方罗汉果清肺制剂为复方罗汉果清肺糖浆或复方罗汉果清肺颗粒；

所述供试品溶液的制备中，调pH至中性所用的碱溶液为弱碱溶液；所述层析柱分离技术中采用的层析柱为大孔吸附树脂柱D101；

(3)色谱条件：采用Waters Sunfire C18液相色谱柱；以乙腈-磷酸水为流动相进行检测，流速：0 .8mL/min；柱温：25℃；检测波长：210nm；进样量：10μL；

所述色谱条件中，以乙腈-0 .2％磷酸水为流动相进行梯度洗脱，所述的梯度洗脱为:0min→10min→20min→47min→60min→90min→95min，流动相中乙腈的体积浓度变化为10％→13％→17％→20％→23％→26％→26％，流动相中0.2％磷酸水的体积浓度为90％→87％→83％→80％→77％→74％→74％；

(4)特征图谱构建：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所用的弱碱溶液为氨水或5％碳酸氢钠溶液。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，取复方罗汉果清肺制剂样品，加弱碱溶液调pH至中性，精密量取5ml，加至大孔吸附树脂柱D101上，以水20mL洗脱，弃去水液，再用体积分数为30％的乙醇20ml洗脱，弃去洗脱液，继续用体积分数为70％的乙醇20mL洗脱，收集洗脱液；蒸干后，取蒸干得到残渣，加体积分数为80％甲醇溶解，转移至5ml容量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，色谱柱规格为4.6mm×250mm，5μm。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱D101的内径为1cm、柱高为20cm。

6.一种如权利要求1-5任一所述的复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱的构建方法在复方罗汉果清肺制剂的质量检测中的应用。

7.一种复方罗汉果清肺制剂的质量检测方法，其特征在于，所述的质量检测方法包括：采用如权利要求1-5任一所述的构建方法得到待检测复方罗汉果清肺制剂的HPLC图谱，并将其与权利要求1-5任一所述的构建方法构建的复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱进行比较。

8.根据权利要求7所述的质量检测方法，其特征在于，所述的质量检测方法包括如下步骤：

1)使用HPLC法得到待检测复方罗汉果清肺制剂的HPLC图谱，并使用木犀草苷为对照峰，计算各色谱峰的相对保留时间；

2)将步骤1)得到的相对保留时间与权利要求1-5任一所述的构建方法构建的复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱中特征峰相对保留时间进行比较；

3)根据步骤2)的比较结果判断所述待检测复方罗汉果清肺制剂的质量是否符合标准。

9.根据权利要求8所述的质量检测方法，其特征在于，3)中，根据步骤2)的比较结果判断所述待检测复方罗汉果清肺制剂中是否同时包含如权利要求1-5任一所述的构建方法构建的复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱中的特征峰，如果是，则符合标准，如果否，则不符合标准。