[发明专利]用于DNA编码化合物库构建中的碱性缓冲液及其应用

权利要求书

1.一种碱性缓冲液在DNA编码化合物库构建中用于DNA-CO₂H与小分子有机胺的酰胺合成反应中的应用，其特征在于，所述碱性缓冲液是浓度为250 mM，pH为9.4±0.1，电导率为5177 ppm±10%，密度为1.0246 g/mL±3%的硼酸缓冲液；所述酰胺合成反应的反应条件是：1）将DNA-CO₂H溶于所述硼酸缓冲液中至摩尔浓度为0.1~2.0 mM，加入20~500摩尔当量缩合剂和20~500摩尔当量缩合活化剂，且缩合活化剂比缩合剂的摩尔当量多出0~100当量，反应2~60分钟，反应温度为20~80℃；2）然后加入20~500摩尔当量小分子有机胺，反应60~360分钟，反应温度为20~80℃；3）然后继续加入20~500摩尔当量缩合剂和20~500摩尔当量缩合活化剂，反应2~60分钟，反应温度为20~80℃；然后加入20~500摩尔当量小分子有机胺，室温下反应直至反应结束；所述DNA-CO₂H是指经过修饰的、带有羧基的单链或双链核苷酸；所述小分子有机胺是指分子中含有1个或2个氨基，所述氨基为伯胺或仲胺，同时分子中没有其他可以与所述氨基在碱性条件下发生反应的功能团，分子量在20~600之间的非氨基酸的有机化合物；

所述缩合剂选自2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐，2-(1H-苯并三偶氮-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯，1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐，1-[双(二甲氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓3-氧化物六氟磷酸盐，6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯中的至少一种；

所述缩合活化剂为二异丙基乙胺，三乙胺中的至少一种。

2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述DNA-CO₂H溶于所述硼酸缓冲液后的摩尔浓度是0.1 mM，0.2 mM，0.3 mM，0.4 mM，0.5 mM，0.6 mM，0.7 mM，0.8 mM，0.9 mM，1.0 mM，1.1 mM，1.2 mM，1.3 mM，1.4 mM，1.5 mM，1.6 mM，1.7 mM，1.8 mM，1.9 mM，或2.0 mM。

3. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述DNA-CO₂H溶于所述硼酸缓冲液后的摩尔浓度为1.0 mM。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缩合剂为2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤1）或步骤3）中，所述缩合剂的摩尔当量是20当量，30当量，40当量，50当量，60当量，70当量，80当量，90当量，100当量，110当量，120当量，130当量，140当量，150当量，160当量，170当量，180当量，190当量，200当量，210当量，220当量，230当量，240当量，250当量，260当量，270当量，280当量，290当量，300当量，310当量，320当量，330当量，340当量，350当量，360当量，370当量，380当量，390当量，400当量，410当量，420当量，430当量，440当量，450当量，460当量，470当量，480当量，490当量，或500当量。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，缩合剂当量为100当量。

7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缩合活化剂为二异丙基乙胺。