[发明专利]一种半胱氨酸荧光探针及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种半胱氨酸荧光探针及其制备方法和应用，所述半胱氨酸荧光探针为4‑[7‑(二乙氨基)‑2,2‑二氟苯并[e][1,3,2]恶唑硼烷‑3‑基]苯基丙烯酸酯。制备方法包括：(1)4‑(二乙氨基)水杨醛与对氨基苯酚发生缩合反应；(2)步骤(1)所得的5‑二乙氨基‑2‑[[(4‑羟基苯基)亚胺]甲基]‑苯酚与三氟化硼乙醚溶液在碱性条件下反应；(3)步骤(2)所得的4‑[7‑(二乙氨基)‑2,2‑二氟苯并[e][1,3,2]恶唑硼烷‑3‑基]苯酚与丙烯酰氯反应，得到半胱氨酸荧光探针。本发明荧光探针分子对半胱氨酸的检测表现出较高的选择性和灵敏度。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，尤其涉及一种半胱氨酸荧光探针及其制备方法和应用。

背景技术

生物体内的硫醇如半胱氨酸(Cys)，谷胱甘肽(GSH)，同型半胱氨酸(Hcy)在生理和病理过程中起至关重要的作用。然而，细胞内硫醇水平的改变与很多疾病密切相关。体内缺乏半胱氨酸会导致多种病症，如儿童生长缓慢，肝损伤和皮肤损伤等。谷胱甘肽(GSH)在细胞内含量在1mM到15mM之间，是细胞内最富裕的硫醇，在维持细胞的氧化还原动态平衡中起着重要作用。血液中同型半胱氨酸的浓度增加会导致维生素B12的缺失和老年痴呆症。由于半胱氨酸，谷胱甘肽和同型半胱氨酸具有不同生理和病理功能，因此，检测半胱氨酸而不受谷胱甘肽和同型半胱氨酸显得尤为重要。

荧光探针由于具有选择性好、灵敏度高、快速简便等优点，因此，开发半胱氨酸荧光探针越来越受到重视。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种选择性好、灵敏度高、快速简便的半胱氨酸荧光探针，还相应提供该半胱氨酸荧光探针的制备方法及应用。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种半胱氨酸荧光探针，所述半胱氨酸荧光探针为4-[7-(二乙氨基)-2,2-二氟苯并[e][1,3,2]恶唑硼烷-3-基]苯基丙烯酸酯，结构式如式(1)：

作为一个总的发明构思，本发明还提供一种上述的半胱氨酸荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

(1)4-(二乙氨基)水杨醛与对氨基苯酚发生缩合反应，得到5-二乙氨基-2-[[(4-羟基苯基)亚胺]甲基]-苯酚，结构式如式(3)：

(2)步骤(1)所得的5-二乙氨基-2-[[(4-羟基苯基)亚胺]甲基]-苯酚与三氟化硼乙醚溶液在碱性条件下反应，得到4-[7-(二乙氨基)-2,2-二氟苯并[e][1,3,2]恶唑硼烷-3-基]苯酚，结构式如式(2)：

(3)步骤(2)所得的4-[7-(二乙氨基)-2,2-二氟苯并[e][1,3,2]恶唑硼烷-3-基]苯酚与2,4-二硝基苯磺酰氯发生磺酰化反应，得到式(1)所示的化合物。

优选的，所述步骤(1)的具体过程为：

将4-(二乙氨基)水杨醛和对氨基苯酚溶于无水乙醇中，加热回流缩合反应10～50min，将缩合反应液冷却至室温加入石油醚，减压过滤，用石油醚淋洗，得固体产物为5-二乙氨基-2-[[(4-羟基苯基)亚胺]甲基]-苯酚。

优选的，所述4-(二乙氨基)水杨醛和对氨基苯酚的摩尔比为1∶1.1～1.5。

优选的，所述步骤(2)的具体过程为：