[发明专利]一种Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-Nε-乙酰基-L-赖氨酸的制备方法

说明书

本发明公开了一种Nα‑[(9H‑芴‑9‑基甲氧基)羰基]‑Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸的制备方法，主要解决原工艺中的复杂性，周期长，收率低，成本高等技术问题，本发明制备方法包括以下步骤：第一步，将赖氨酸盐酸盐和铜盐反应做成赖氨酸铜络合物；第二步，将赖氨酸铜络合物和乙酰基供体反应制得Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸铜络合物；第三步，将Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸铜络合物脱铜得到Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸水溶液；第四步，将Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸水溶液和fmoc‑基团的保护剂混合，在有机溶剂参与下，用碱性化合物碳酸钠水溶液调节pH值为8‑9，反应制得Nα‑[(9H‑芴‑9‑基甲氧基)羰基]‑Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸。本发明通过合理的工艺路线的设置制备得到Nα‑[(9H‑芴‑9‑基甲氧基)羰基]‑Nε‑乙酰基‑L‑赖氨酸，适合大批量生产。

技术领域

本发明涉及多肽合成，特别涉及一种Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-Nε-乙酰基-L-赖氨酸的制备方法。

背景技术

目前现有技术中，一种Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-Nε-乙酰基-L-赖氨酸路线为先在赖氨酸铜盐的Nε上引入Boc，再在Nα上引入Fmoc，再酸化、脱铜得Fmoc-lys(Boc)-OH，方法如Zhao,yinan；Zhang,Shubiao 等人的Journal of Materials Chemistry B，2015vol.3，#1，p.119-126。 再脱除boc基团，得到Fmoc-lys-OH，方法如Tahoori,Fatemeh；Balalaie,Saeed等人的Amino Acids，2014，vol.46，#4，p.1033-1046。之后再和乙酰基反应得到Fmoc-lys(Ac)-OH，方法如Huhtiniemi,Tero；Suuronen,Tiina等人的Bioorganic andMedicinal Chemistry，2010，vol.18，#15，p.5616-5625。

这种方法操作过程步骤比较繁琐，得率低，上乙酰基这步的得率仅为57%；周期长，引入Boc和Fmoc的反应就耗时30小时，之后还要脱除Boc；成本高，引入Boc时额外使用了8-羟基喹啉，脱Boc时又使用三乙基硅烷，三氟乙酸；再考虑原料的危险性，8-羟基喹啉是致癌物质、三乙基硅烷有一定毒性，三氟乙酸受热易分解产生有毒气体，且具有强腐蚀性，上乙酰基的步骤中又用到吡啶，既会有恶臭，又是致癌物。

发明内容

本发明技术目的在于克服原工艺中的复杂性，周期长，成本高，收率低等技术问题，提供了一种 Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-Nε-乙酰基-L-赖氨酸的制备方法。

为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是： 一种Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-Nε-乙酰基-L-赖氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1.1将赖氨酸盐酸盐和铜盐反应做成赖氨酸铜盐；具体步骤如下，将赖氨酸盐酸盐溶于水中，充分搅拌，升温，缓慢加入铜盐，得到赖氨酸铜盐。

1.2将赖氨酸铜盐和乙酰基供体反应制得Nε-乙酰基-L-赖氨酸铜盐；具体步骤如下，用碱调节pH等于9，降温，缓慢滴加乙酰基供体。保持pH稳定。Tlc点板跟踪反应情况。反应完成，离心甩料，得到Nε-乙酰基-L-赖氨酸铜盐。

1.3将Nε-乙酰基-L-赖氨酸铜盐脱铜得到Nε-乙酰基-L-赖氨酸水溶液；具体步骤如下，将Nε-乙酰基-L-赖氨酸铜盐固体悬浮于水中，充分搅拌，升温，加入脱铜剂解离，得到Nε-乙酰基-L-赖氨酸水溶液；TLC检测反应完成。

1.4 将Nε-乙酰基-L-赖氨酸水溶液和fmoc-基团的保护剂混合，在有机溶剂参与下，用碱性化合物碳酸钠水溶液调节pH值为8-9，反应制得Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-Nε-乙酰基-L-赖氨酸。

所述1.1和1.2步方案中赖氨酸盐酸盐与铜盐和乙酰基供体的摩尔比为1:0.5:（2-3）。