[发明专利]胰腺癌动物模型的构建方法

说明书

本发明提供了一种胰腺癌动物模型的构建方法，包括：(1)构建KC鼠并对KC鼠进行扩繁得到KC鼠的子代；(2)准备P53鼠并对P53鼠进行扩繁得到P53鼠的子代；(3)采用所述KC鼠的子代与所述P53鼠的子代进行繁殖得到KPC胰腺癌鼠模型。本发明的构建方法具有时间短、成本低的优点。

技术领域

本发明属于医学生物学技术领域，具体地，本发明涉及一种动物模型的构建方法，更具体地，本发明涉及一种胰腺癌动物模型的快速构建方法。

背景技术

胰腺癌具有临床表现缺乏特异性、早期诊断困难、手术切除率低等特点，所以通常难以获得不同发病阶段的胰腺癌组织标本，也难以在临床上观察胰腺癌的发生、发展过程。因此，通过胰腺癌动物模型，可以在动物体内模拟人胰腺癌的发生、发展过程，为深入研究胰腺癌的发生、发展机制以及指导治疗奠定基础。

胰腺癌动物模型例如胰腺癌鼠模型包括Kras KO、P53KO、PC、KC和KPC鼠，这些模型均易发生肿瘤，但是周期均较长，有的甚至长达数月。在这些模型中，KPC鼠模型由于包含3种基因缺陷，因此与其它胰腺癌模型(细胞系、异种移植瘤等)相比，存在扩繁费用较高、周期更长等缺陷。

但是，KPC鼠模型保留了胰腺癌天然的肿瘤微环境和免疫系统，为胰腺癌的肿瘤免疫机制研究和免疫治疗以及化疗增敏治疗等提供了有利便捷的工具。

因此，目前急需一种能够快速且低成本的获得KPC胰腺癌动物模型的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供了一种胰腺癌动物模型的构建方法。

本发明的胰腺癌动物模型的构建方法包括：(1)构建KC鼠并对KC鼠进行扩繁得到KC鼠的子代；(2)准备P53鼠并对P53鼠进行扩繁得到P53鼠的子代；(3)采用所述KC鼠的子代与所述P53鼠的子代进行繁殖得到KPC胰腺癌鼠模型。

进一步，步骤(1)中，所述构建KC鼠采用如下方法进行：将LSL-Kras^G12D鼠与Pdx1-Cre鼠按照雌：雄＝1∶1至3∶1进行合笼交配，获得的LSL-Kras^G12D阳性且Pdx1-Cre阳性的子代即为所述KC鼠。

进一步，步骤(1)中，所述对KC鼠进行扩繁得到KC鼠的子代采用如下方法进行：采用所述KC鼠与野生型鼠自然交配进行扩繁得到KC鼠的子代；或者，采用所述KC鼠的精子与野生型鼠的卵子通过快速扩繁进行扩繁得到KC鼠的子代。

进一步，所述KC鼠是杂合KC鼠。

进一步，步骤(2)中，所述对P53鼠进行扩繁得到P53鼠的子代采用如下方法进行：采用所述P53鼠与野生型鼠自然交配进行扩繁得到P53鼠的子代；或者，采用所述P53鼠的精子与野生型鼠的卵子通过快速扩繁进行扩繁得到P53鼠的子代。

进一步，所述P53鼠是纯合P53鼠或杂合P53鼠。

进一步，步骤(3)中，采用所述KC鼠的子代与所述P53鼠的子代自然交配进行繁殖得到KPC胰腺癌鼠模型；或者，采用所述KC鼠的子代的卵子与所述P53鼠的子代的精子通过快速扩繁进行繁殖得到KPC胰腺癌鼠模型。

进一步，所述P53鼠的子代是P53纯合雄鼠或P53杂合雄鼠。

进一步，所述P53鼠的子代是P53纯合雄鼠。

进一步，所述KC鼠的子代是杂合KC鼠。

本发明的技术方案至少具有如下有益效果：

(1)本发明的构建方法基于IVF快速扩繁技术，能够在短时间内获得KPC胰腺癌鼠模型，具有时间短且成本低的优点。

(2)本发明的构建方法主要以P53纯合雄鼠来进行扩繁，使KPC胰腺癌鼠模型的获得比例提高了一倍。