[发明专利]一种检测烟草青枯病菌的胶体金试纸条及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测烟草青枯病菌的胶体金试纸条，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；其特征在于，所述反应膜上具有包被有青枯病菌捕获抗体的检测线和包被有羊抗鼠二抗的质控线，所述结合物释放垫上喷涂有青枯病菌检测抗体-胶体金标记物，所述青枯病菌捕获抗体及青枯病菌检测抗体是由青枯病菌外泌蛋白为免疫原制备获得具有不同表位的单克隆抗体；所述青枯病菌外泌蛋白是通过构建质粒，利用大肠杆菌表达体系表达、纯化制备获得；制备青枯病抗体的免疫原为青枯病菌外泌蛋白时，是指多聚半乳糖醛酸内切酶、果胶酶、外多聚半乳糖醛酸酶、海藻酸裂解酶。

2.根据权利要求1所述的检测烟草青枯病菌的胶体金试纸条，其特征在于：所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫依次粘贴在底板上，且结合物释放垫1/3~1/2被覆盖于样品吸收垫下。

3.一种制备权利要求1-2任一项所述胶体金试纸条的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）制备喷涂有青枯病菌检测抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2）制备包被青枯病菌捕获抗体的检测线和包被羊抗鼠二抗的质控线反应膜；

3）将1）和2）制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

4.一种应用权利要求1-3任一项所述试纸条检测烟叶及植烟土壤样品中青枯病菌的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1）对样品进行前处理；

2）用所述的试纸条进行检测；

3）分析检测结果。