[发明专利]一种三文鱼中埃玛菌素残留的化学分析方法

说明书

本发明公开了一种三文鱼中埃玛菌素残留的化学分析方法，采用乙腈‑二氯乙烷‑正己烷‑乙酸溶液提取三文鱼肉，并经超临界提取法充分提取待测残留，再经弗罗里硅土柱吸附干扰的蛋白质、脂肪及其他脂类物质，进而充分的将三文鱼中残留的埃玛菌素提取出，提高了埃玛菌素的检测限，为三文鱼中埃玛菌素残留的检验检测提供了更简单、灵敏的化学分析方法。

技术领域

本发明涉及一种化学分析方法，具体属于水产品类毒素残留的分析方法，特别是三文鱼中残留的埃玛菌素的检测分析方法。

背景技术

三文鱼是一种冷水洄游性鱼类，营养丰富，富含不饱和脂肪酸，能有效降低血脂和血胆固醇，防治心血管疾病；鱼肉中的蛋白质含有18中氨基酸，且蛋白质含量明显高于其他鱼类，能有效地预防诸如糖尿病等慢性疾病的发生、发展；此外，三文鱼还富含多种矿物质如钙、磷、镁等，因而具有很高的营养价值。基于三文鱼极高的营养价值，再结合其鳞小刺少，肉色橙红，肉质细嫩鲜美，口感爽滑，既可直接生食，又能烹制菜肴，是深受人们喜爱的鱼类。由于三文鱼的市场需求越来越大，野生三文鱼数量有限捕捉器受限并且难以捕捉到，因此人工养殖的三文鱼成为三文鱼市场的主要来源。然而，海虱是以三文鱼皮肤及外膜为食物的寄生虫，不断威胁三文鱼养殖业，因而养殖企业为控制海虱会使用有毒制剂埃玛菌素，埃玛菌素虽能控制海虱，但一旦用量过度，残余在鱼体内，最终会通过食物链进入人体，伤及人体神经冲动；此外，研究证实，埃玛菌素进入水体，也会影响不少水生动物，如对贝类有致命伤害，若养殖地打捞出的三文鱼埃玛菌素超标，可能最终殃及食客健康。可见，虽然海虱对三文鱼养殖业冲击日益严重，但企业为抑制海虱而往往过量使用埃玛菌素，也已影响到公共安全，因此，严格控制埃玛菌素的使用是三文鱼养殖业需要关注的问题，同时，对于埃玛菌素在三文鱼体内残留的检测，也是疾控部门和检验检疫部门的重中之重。

埃玛菌素为白色或淡黄色结晶粉末，熔点在141-146℃，溶于丙酮和甲醇、乙醇等有机溶剂，在通常储存的条件下对热稳定，对光不稳定，在强酸强碱条件下不稳定。由于其存在于三文鱼中，目前针对其在鱼类中的药物残留分析，通常采用QuEchERS方法、分子印迹技术、固相萃取法进行前处理技术。针对埃玛菌素的药物残留通常采用高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用技术、高效液相色谱-荧光检测联用技术、高效液相色谱-紫外检测联用技术和免疫分析技术作为分析检测技术，为药物在水产品中的残留的控制和检测提供主要依据。目前针对埃玛菌素的检测中，采用液相色谱-荧光法进行残留的检测时，多以乙腈作为提取溶剂充分提取埃玛菌素，同时减少杂质提取，并采用流动相乙腈/甲醇/水三元梯度洗脱，虽然准确性和精确性较高，然而，其样品处理复杂繁琐，使得处理过程中损失部分埃玛菌素，因而其分析检测效果会由于处理过程中成分的损失而有所疏漏，由此，如何进一步精确检测三文鱼中埃玛菌素的残留从而控制食品安全性、提供一种有校检测三文鱼中埃玛菌素残留量的化学分析方法，是本申请人多年研究的重点。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术中上述缺陷，提供一种有校检测三文鱼中埃玛菌素残留量的化学分析方法，包括：

步骤一、将鱼糜样品2g放入离心管，加入6ml乙腈-二氯乙烷-正己烷-乙酸溶液，离心管于50℃水浴放置10min，待溶解后进行涡旋振荡2min旋转混匀；

步骤二、加入2g氯化钠，均质20s，采用超声波辅助提取5min，以4000r/min离心5min，过滤滤液浓缩备用；

步骤三、用两倍柱体积的乙腈及正己烷混合液冲洗弗罗里硅土净化层析柱，加入浓缩滤液后采用乙腈-二氯乙烷-乙酸洗脱并接收，收集洗脱液，浓缩后吹干，用于含量测定；

步骤四、采用超高效液相色谱对待测样品进行测定。

优选的，步骤一中乙腈-二氯乙烷-正己烷-乙酸比例为80：15：4.5：0.5。

优选的，步骤三中乙腈及正己烷体积比85:15。

优选的，步骤三中乙腈-二氯乙烷-乙酸比例为85：14.5：0.5。