[发明专利]一种脱脂米糠中的膳食纤维的改性方法

权利要求书

1.一种脱脂米糠中的膳食纤维的改性方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)种子液配制：在超净工作台中，用无菌水冲洗含绿色木霉菌的PDA培养基，制备孢子悬液，并稀释至孢子浓度为10⁷～10⁸个孢子/ml，之后，将稀释后的孢子液5ml接种至装有50ml种子培养基的容器中，摇床转速150r/min，28℃震荡培养3d，得到种子液；

2)发酵培养基制备：在容器中加入脱脂米糠粗粉液、K₂HPO₄ 2.0g、MgSO₄·7H₂O 0.3g、CaCl₂ 0.3g、CMC-Na 10g、蛋白胨0.5g、FeSO₄﹒7H₂O 0.0015g、MnSO₄·H₂O 0.0016g、ZnSO₄﹒7H₂O 0.0015g、CoCl₂﹒6H₂0 0.002g，加水定容至1L，调节pH在5.8，在121℃下高压蒸汽灭菌30min配制成发酵培养基，备用；

3)发酵：步骤2)得到的发酵培养基上接种步骤1)得到的种子液，接种量为发酵培养基体积的10％，发酵温度为28℃，于恒温培养振荡器中发酵41h；

4)将步骤3)得到的发酵液调节pH到6.5，加入热稳定α-淀粉酶95℃下反应30min，再调节pH到6.5后加入木瓜蛋白酶65℃下水解1h，沸水浴10min后，离心取上清液，然后加入4倍体积的95％乙醇醇沉；

其中，所述步骤1)中的种子培养基的制备方法包括如下步骤：在容器中加入NaNO₃2.0g、K₂HPO₄ 1.0g、KCl 0.5g、MgSO₄﹒7H₂O 0.5g、FeSO₄ 0.01g、蔗糖30g、琼脂20g、用水定容至l L，自然pH值，在121℃下高压蒸汽灭菌30min，配制成种子培养基；

所述步骤2)中的脱脂米糠粗粉的制备过程如下：取干燥脱脂米糠机械粉碎，过100目筛，得到脱脂米糠粗粉；加入的脱脂米糠粗粉液为脱脂米糠粗粉与无菌水混合得到，其中，脱脂米糠粗粉与无菌水的体积比为1：15；

所述步骤4)中的热稳定α-淀粉酶的活力为200000U/g，添加量为0.01ml/g，以加入的脱脂米糠粗粉的质量为基准，所述步骤4)中的木瓜蛋白酶酶活为50000U/g，添加量为加入的脱脂米糠粗粉质量的0.5％。

2.根据权利要求1所述的一种脱脂米糠中的膳食纤维的改性方法，其特征在于，所述步骤1)中的含绿色木霉菌的PDA培养基的制备方法包括如下步骤：

在超净工作台中，将绿色木霉菌种冻干管在酒精灯火焰上加热，滴加无菌水使之破裂，用镊子敲下顶端，然后用0.5ml的无菌水滴入管内，吸取全部菌悬液接种于PDA培养基中，28℃培养3～4d，经2～3次接代培养，得到含绿色木霉菌的PDA培养基。

3.根据权利要求1所述的一种脱脂米糠中的膳食纤维的改性方法，其特征在于，所述PDA培养基的制备包括如下步骤：

取去皮的马铃薯200g，切成小块，加水100ml煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000ml，之后，将20％马铃薯汁1L、葡萄糖20g、KH₂PO₄3 g、MgSO₄﹒7H₂O 1.5g、硫胺素8mg、琼脂20g装于锥形瓶中，在121℃下高压蒸汽灭菌30min，配制成PDA培养基。