[发明专利]脂质体二甲基姜黄素抑制二肽肽酶I和基质金属蛋白酶9活性

说明书

脂质体二甲基姜黄素，是脂质体包封的二甲基姜黄素(Liposome‑encapsulated dimethylcurcumin，Lipo‑DiMC)。二甲基姜黄素是一种合成的姜黄素类似物，化学式是C₂₃H₂₄O₆。和姜黄素和二甲基姜黄素相比，Lipo‑DiMC具有更好的代谢稳定性且具有高水溶性并在生物体内有缓释效果。在一些炎症、自身免疫性和癌症疾病中，二肽肽酶I(Dipeptidyl peptidase,DPPI)和基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase‑9，MMP‑9)有过度表达，导致组织细胞微环境改变和体内平衡紊乱，并引起细胞生殖紊乱。在Lipo‑DiMC治疗胶原诱导关节炎(Collagen induced arthritis，CIA)大鼠模型中，Lipo‑DiMC缓解CIA大鼠脚趾的肿胀，并抑制CIA大鼠体液、血液中和脾淋巴细胞中DPPI和MMP‑9活性的过度表达。体外大鼠脾淋巴细胞模型也进一步验证，Lipo‑DiMC对大鼠脾淋巴细胞内的DPPI活性和MMP‑9表达分泌均有抑制和调节作用。

技术领域

本发明涉及到脂质体二甲基姜黄素对二肽肽酶I和基质金属蛋白酶9的体内和体外的抑制作用，属于药物用途的发明。

背景技术

二甲基姜黄素(Dimethyl curcumin)是一种合成的姜黄素(Curcumin)类似物，化学式是C₂₃H₂₄O₆。姜黄素主要来源于姜科、天南星科植物的根茎，是二酮类化合物，水溶性和稳定性差。二甲基姜黄素将姜黄素结构中的酚羟基取代为甲氧基，相比姜黄素，二甲基姜黄素具有更好的代谢稳定性，但两者都是低水溶性的。脂质体二甲基姜黄素(Liposome-encapsulated dimethyl curcumin，Lipo-DiMC)具有高的水溶性并且在生物体内有缓释的效果。

姜黄素和二甲基姜黄素都有重要的药用价值，有抗癌、抗炎、抗病毒和抗关节炎的作用，但作用机制尚不明确。二肽肽酶I(Dipeptidyl peptidase,DPPI)又称组织蛋白酶C，表达于免疫颗粒细胞，包括淋巴细胞、中性粒细胞和肥大细胞等，是炎症蛋白酶丝氨酸蛋白酶的激活酶。胶原诱导的关节炎大鼠模型中，DPPI高表达于血液、滑膜和骨髓，且和类风湿性关节炎严重程度呈正相关。基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase-9，MMP-9)又称明胶酶B(Gelatinase B,92 kDa)，可由单核细胞、中性粒细胞等分泌，参与细胞外基质降解，影响细胞生存和死亡的微环境，并影响新生血管形成。MMP-9的过度表达在炎症疾病和癌症侵袭中发挥重要作用。

本发明通过建立胶原诱导的关节炎大鼠模型并用Lipo-DiMC关节腔注射类风湿关节炎大鼠，观察Lipo-DiMC对大鼠体内DPPI和MMP-9表达的作用。同时，本发明利用新鲜提取的大鼠脾淋巴细胞建立体外细胞模型，观察Lipo-DiMC对淋巴细胞DPPI活性和MMP-9表达的作用。本发明通过荧光高通量法检测大鼠血清和脾淋巴细胞DPPI活性、明胶酶谱法检测大鼠血清和脾淋巴细胞分泌的MMP-9活性。

本发明通过体外和体内两个方面验证Lipo-DiMC对DPPI和MMP-9的作用。

发明内容

1.发明内容简述：

通过胶原诱导的关节炎大鼠模型和体外细胞模型，我们在体内和体外实验中发现Lipo-DiMC对胶原诱导关节炎大鼠的体液和血清DPPI和MMP-9有抑制作用，并对脾淋巴细胞内DPPI和脾淋巴细胞分泌MMP-9有抑制作用。

2.发明技术方案：

2.1本发明目的之一是通过动物模型体内实验证实Lipo-DiMC(粒径0.2μm)对CIA大鼠体液和血液中DPPI过度活性和MMP-9过度表达有抑制作用。