[发明专利]一种高通量两系不育系选育的方法

权利要求书

1.一种高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，该方法包含：

(1)以携带光温敏核不育基因的水稻为受体材料，与含有目标性状基因的水稻为供体材料，两者杂交得到F1代种子，种植所述F1代种子，并进行单株自交，获得F2代种子；

(2)将F2代种子经消毒、浸种、催芽后，播种在穴盘中密植，灌水施肥，置于28～32℃环境下生长，防虫防病，并控制单株分蘖个数；

(3)待所述穴盘中的F2代群体水稻植株生长进入幼穗分化期时，开启冷水循环系统，设定冷水温度为22.5～23.5℃，当群体植株开始进入育性敏感期时，将所述穴盘放入冷水循环系统，使用设定的冷水温度进行冷水低温处理若干天，将所述穴盘移出所述冷水循环系统，在适温生长；

(4)待抽穗时，开始观察筛选：对于花药有花粉散出的单株，直接拔除；对于目测没有花粉产生的单株，则取穗支梗进行花粉育性显微镜下观察，在碘化钾染色下镜检，对经过镜检观察发现有可染花粉的单株，直接拔除，无可染花粉的单株保留，则割兜留桩，在25～32℃温度下待再生穗抽穗；

(5)在适温环境下，待再生幼穗将进入育性敏感期时，将割兜水稻的穴盘移入设定温度为19～22℃的冷水池系统，低温处理若干天，再转移到25～32℃无风环境，待抽穗自交结实；

(6)将所述结实的种子收获，混合，得到F3代种子，重复步骤(2)-(5)，经过2轮连续的低温筛选，收获F4代种子，F4代种子的光温敏核不育基因已纯合，育性起点温度已经稳定；

(7)播种F4代种子，栽插到大田，观察田间表现，进行田间农艺性状选择，根据单株的农艺性状，依据农艺目标性状保留中标单株，割兜，在所述冷水循环系统19～22℃低温处理，进行单株自交繁种，收获F5代种子；

(8)播种F5，从F5代起重复步骤(7)，连续进行2～3个世代的大田农艺性状选择，择优选定单株或者家系；

(9)在数个世代的大田农艺性状选择结束后，将最后定型世代的种子进行原种扩大繁殖，得到生产用种。

2.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述目标性状基因包含：矮杆基因、抗病基因和优质基因中任意一项或两种以上。

3.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述单株自交采用套袋自交。

4.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(1)中，若杂交的父本和母本均携带有所述光温敏核不育基因，且在正常生长季节不育，则杂交在平均气温为19～23℃下进行。

5.根据权利要求4所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，所述杂交在海南春季2～3月份进行，或在本地夏季待父本和母本幼穗发育至6期前进行19～22℃的低温处理，待抽穗后进行杂交。

6.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述穴盘为72目或128目穴盘；所述穴盘中密植规模为1000～2000株；所述分蘖个数控制在1～3个。

7.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述育性敏感期为幼穗分化3～6期；所述穴盘置于冷水循环系统中，保证水面淹没幼穗生长点，且冷水低温连续处理5～7天。

8.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述留桩为15cm；在步骤(5)中，所述低温处理7～10天。

9.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(7)中，所述农艺目标性状包含：生育期、株高、粒型、穗型、抗性和开花异交习性。

10.根据权利要求1所述的高通量两系不育系选育的方法，其特征在于，在步骤(7)中，所述中标单株规模控制在50～100株。