[发明专利]一种乳酸检测干化学试纸及其制备方法

说明书

本发明涉及一种乳酸检测干化学试纸及其制备方法，属于体外诊断试纸技术领域。解决了如何提供一种简单、快捷、安全、有效，对阴道炎的诊断具有很高的敏感度和特异性的乳酸检测干化学试纸及其制备方法的问题。本发明的乳酸检测干化学试纸，为分散有底物、酶、螯合剂、保护剂和缓冲物的滤纸；其中，底物为联苯胺类或联苯胺类衍生物；酶为乳酸氧化酶和过氧化物酶。该干化学试纸可一步测定乳酸含量，简单、快捷、安全、有效、敏感度高、特异性好。

技术领域

本发明属于体外诊断试纸技术领域，具体涉及一种乳酸检测干化学试纸及其制备方法。

背景技术

下生殖道感染属于妇科常见病，易导致流产、不孕不育、宫颈糜烂甚至宫颈癌，现已成为发展中国家面临的重要公共卫生问题。

阴道炎以各种原因导致的阴道菌群失调及以阴道微生态平衡破坏为首要影响因素。近年来临床病例显示常见妇女阴道炎多数是由大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、伤寒杆菌和肠球菌引起的。乳酸杆菌是健康妇女阴道中的正常菌种和优势菌群，它是一种微需氧菌群，与阴道菌群之间形成微生态平衡并制约其他菌的生长。乳酸杆菌的代谢产物(乳酸)可以降低阴道pH值，维持阴道的生态平衡，作为妇女阴道的清洗剂，无毒、无副作用，在保持阴道清洁等方面起重要作用。研究表明各种阴道炎患者的乳酸杆菌数量明显下降，乳酸杆菌的替代、排斥和竞争等保护作用减少或消失，寄生在阴道的支原体、真菌、加德纳杆菌、或其他外来病原微生物在阴道中大量繁殖，引起各种阴道炎的发作，阴道中乳酸杆菌数量的减少在各种阴道炎的发病过程中起着非常关键的作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单、快捷、安全、有效，对阴道炎的诊断具有很高的敏感度和特异性的乳酸检测干化学试纸及其制备方法。

本发明解决上述技术问题采取的技术方案如下。

乳酸检测干化学试纸，该干化学试纸为分散有底物、酶、螯合剂、缓冲物和保护剂的滤纸；

所述底物为聚苯胺类或聚苯胺类衍生物；

所述酶为乳酸氧化酶和过氧化物酶。

优选的是，所述底物为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺衍生物、N，N-二甲基苯胺盐酸盐、对氨基-N,N-二甲基苯胺盐酸盐或对氨基-N,N-二甲基苯胺盐酸盐衍生物。

优选的是，所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)。

优选的是，所述保护剂为海藻糖、葡萄糖、牛血清白蛋白中的一种或多种。

优选的是，所述缓冲物为乙酸钾缓冲物、磷酸盐缓冲物、柠檬酸缓冲物中的一种或多种。

优选的是，所述滤纸为7218型滤纸、31ET型滤纸、3MM型滤纸或526型滤纸。

上述乳酸检测干化学试纸的制备方法，步骤如下：

步骤一、将酶溶解于含有螯合剂和保护剂的缓冲液中，形成浸液A，用浸液A浸润滤纸，干燥，得到分散有酶的滤纸；

步骤二、将底物溶解于醇溶剂中，形成浸液B，用浸液B浸润步骤一得到的分散有酶的滤纸，干燥，裁切，得到乳酸检测干化学试纸。

优选的是，所述浸液A中，乳酸氧化酶的浓度为19KU/L-30KU/L，过氧化物酶的浓度为50KU/L-150KU/L。

优选的是，所述含有螯合剂和保护剂的缓冲液的pH为3-7；更优选的是，pH为4-5。

优选的是，所述含有螯合剂和保护剂的缓冲液的离子强度为0.2-1M；更优选的是，离子强度为0.5-0.8M。

优选的是，所述缓冲液的浓度为0.1-1M，缓冲液为乙酸钾缓冲液、磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲液中的一种或多种。