[发明专利]RPRM基因及其表达产物的新用途

说明书

本发明涉及RPRM基因及其表达产物的新用途。具体地，本发明涉及基因Reprimo(RPRM)及其表达产物抑制DNA损伤修复通路、增加肿瘤细胞放射敏感性的新功能。更具体涉及其在临床肿瘤放疗增敏辅助治疗中的应用。RPRM对肿瘤细胞的增敏效应是由于它抑制了DNA损伤修复通路的核心上游蛋白ATM，通过降低ATM的表达水平从而抑制其活化水平及活化后诱导激活的下游一系列DNA损伤修复相关蛋白的表达，由此抑制了非同源末端连接和同源重组两条主要的DNA损伤修复通路，降低了细胞的DNA损伤修复能力，使得DNA双链断裂更加严重、细胞对射线敏感性更高。通过上调肿瘤病人肿瘤细胞RPRM表达水平，可以达到增加肿瘤放疗增敏的目的，从而作为肿瘤病人放疗的有效辅助手段。

技术领域

本发明涉及基因Reprimo(RPRM)及其表达产物的新用途。更具体涉及其在肿瘤放疗增敏辅助治疗中的应用。

背景技术

Reprimo(RPRM)是一个受p53调控激活继而参与调控细胞周期的抑癌基因。其蛋白表达产物被高度糖基化修饰并主要定位于细胞质中。RPRM作为一个抑癌基因，通过引发细胞周期阻滞、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡等多重机制参与调控细胞生长和肿瘤细胞迁移，在调节细胞和组织的动态平衡包括增殖、迁移、细胞存活等的信号通路中起着重要作用。研究表明RPRM可抑制Cdc2的表达从而抑制细胞周期蛋白CyclinB1的核转运，引发细胞周期G2/M期阻滞。在包括胃癌、乳腺癌、垂体腺癌、结直肠癌等众多癌症中，由于RPRM启动子的高度甲基化，导致其在肿瘤组织中低表达甚至缺失，从而促进肿瘤细胞增殖和迁移。另一方面，上调RPRM在这些肿瘤组织中的表达水平后，肿瘤的生长和迁移均受到明显抑制，进一步证明RPRM是一个抑癌基因，且这些肿瘤的发生和发展与RPRM的低表达有很大关系。但RPRM在肺癌中的表达水平以及其启动子的甲基化程度尚不清楚。由于RPRM受p53调控，而p53又参与调控细胞DNA损伤修复相关通路，同时RPRM可受到DNA损伤的诱导激活，因此预测RPRM或许参与DNA损伤修复相关通路的应答效应。但是，RPRM调控DNA损伤修复通路和增加肿瘤细胞放射敏感性的作用至今未见报道。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种RPRM基因在肿瘤治疗中的用途，通过上调RPRM的表达水平作为肿瘤病人放疗的有效辅助手段。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种RPRM基因在肿瘤治疗中的用途，所述RPRM基因功能抑制DNA损伤修复通路，增加肿瘤细胞的放射敏感性。

本发明还提供了RPRM基因在制备肿瘤细胞放疗增敏剂中的应用。

所述放疗增敏剂包括携带RPRM基因的载体。在一些实施方案中，所述放疗增敏剂包括携带RPRM基因的真核表达质粒或其它药学上可接受的载体。

本发明还提供了RPRM基因在制备肿瘤细胞放疗增敏试剂盒中的应用。

所述肿瘤细胞放疗增敏试剂盒包含携带RPRM基因的载体，在一些实施方案中，所述肿瘤细胞放疗增敏试剂盒包含携带RPRM基因的真核表达质粒或其它药学上可接受的载体。

本发明还提供了上调RPRM基因表达的试剂在制备肿瘤细胞放疗增敏剂或肿瘤细胞放疗增敏试剂盒中的应用。在本发明的实施方案中，所述上调RPRM基因表达的试剂是携带RPRM基因的载体。在一些实施方案中，所述上调RPRM基因表达的试剂是携带RPRM基因的真核表达质粒或其它药学上可接受的载体。

在本发明的实施方案中，所述RPRM基因构建在pCMV3载体上。在本发明的一个优选实施方案中，所述携带RPRM基因的真核表达质粒是pCMV-HA-RPRM质粒。

本发明还提供了一种放疗增敏试剂盒，所述放疗增敏试剂盒的活性成分包括携带RPRM基因的真核表达质粒。在本发明的实施方案中，所述RPRM基因构建在pCMV3载体上。在本发明的一个优选实施方案中，所述携带RPRM基因的真核表达质粒是pCMV-HA-RPRM质粒。