[发明专利]一种从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法有效
申请号: | 201811209771.6 | 申请日: | 2018-10-17 |
公开(公告)号: | CN109020854B | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 柳志强;熊能;陈涛;余茹;薛亚平;郑裕国 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C07C319/28 | 分类号: | C07C319/28;C07C323/58 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 提取 蛋氨酸 方法 | ||
1.一种从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于所述方法为:
(1)发酵液的预处理:将E.coliW3110ΔmetJΔmetI/pTrc99A/metA*/yjeH菌株先接种到LB培养基中,于温度37℃、转速200rpm摇床上过夜培养;再将培养液按0.1L/3L接种到有MS培养基的发酵罐中培养,在30℃、150rpm培养发酵到OD600=0.8-1.0时,添加终浓度为0.1mM的IPTG,继续培养至48h,得到含L-蛋氨酸的发酵液;将含L-蛋氨酸的发酵液调节pH至1.5-3后,陶瓷膜过滤,取滤液,即为预处理液;
(2)离子交换法:将步骤(1)获得预处理滤液采用强酸型阳离子交换树脂进行柱层析,依次用超纯水和0.5-5.0mol/L氨水洗脱,收集含L-蛋氨酸的流出液;所述强酸型阳离子交换树脂型号为D061;柱层析所用离子交换柱高径比为2-30:1,上样流速为0.5-2.0BV/h;
(3)脱色:将步骤(2)含L-蛋氨酸的洗脱液用活性炭在40℃-65℃水浴条件下脱色,过滤,取滤液,即为含L-蛋氨酸的脱色液;
(4)结晶:将步骤(3)含L-蛋氨酸的脱色液减压浓缩至原体积的5-10%,取浓缩液加入异丙醇,在0℃下搅拌结晶,取晶体用去离子水洗涤至无醇,干燥,得到L-蛋氨酸。
2.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(1)所述发酵液中含5-30g/L的L-蛋氨酸。
3.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(1)陶瓷膜孔径为30-90nm。
4.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(2)所述洗脱的方法为:先用超纯水冲洗3-4BV,再用0.5-5.0mol/L氨水以0.5-2.0BV/h流速洗脱,收集含L-蛋氨酸的流出液。
5.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(3)活性炭的用量以洗脱液体积计为1.0g/L-10.0g/L。
6.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(4)中减压浓缩条件为40-80℃、100rpm。
7.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(4)所述异丙醇的体积用量以浓缩液体积计为2%-10%。
8.如权利要求1所述从发酵液中提取L-蛋氨酸的方法,其特征在于步骤(4)所述干燥方法为真空干燥或喷雾干燥。
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