[发明专利]一种用于恶性肿瘤分级和预后的标志物

说明书

本发明属于生物医学领域，涉及预测肿瘤分级和预后效果的一种新型标志物‑AURKB蛋白切割产物，它是AURKB蛋白切割产物；其切割位点是D75、D76、K85、D186、D238、D255或者D289中的一个或者若干个。本发明还包括AURKB蛋白切割产物作为肿瘤标志物的检测方法和评价标准。本发明的AURKB切割产物可作为肿瘤分级和预后潜在标志物，其蛋白切割位点的靶向抑制剂可用于抗肿瘤治疗。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及肿瘤标志物的开发和应用，具体涉及AURKB蛋白切割产物作为肿瘤标志物的检测方法和评价标准，以及AURKB上存在的蛋白切割位点及其在靶向药物开发中的潜在应用。

背景技术

肿瘤细胞无限增殖和分裂主要依赖于有丝分裂相关过程。靶向参与有丝分裂期相关蛋白是目前较为成功的一类抗肿瘤策略。

AURKB蛋白激酶属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族，是细胞有丝分裂中参与染色体分离和胞质分离的一种重要调控蛋白。AURKB蛋白表达水平异常和激酶活性异常往往导致染色体不稳定和多核现象的发生。目前已经在多种类型的恶性肿瘤组织中检测到AURKB过表达现象,其中包括口腔癌、非小细胞肺癌、肝癌、胆管癌、胃癌、卵巢癌和乳腺癌等。许多研究数据亦显示AURKB表达量和肿瘤分级和预后密切相关，已成为潜在的肿瘤预后评价指标和治疗靶点。

AURKB在有丝分裂中发挥功能主要依赖于激酶活性。目前已知调控AURKB活性的途径主要通过磷酸化修饰。AURKB在T232位点发生自磷酸化修饰对于AURKB激活是必不可少的。活化的AURKB能够通过磷酸化相关底物蛋白，从而对有丝分裂的进程发挥调节作用。但除磷酸化之外，包括SUMO修饰和泛素化修饰在內的多种翻译后修饰也被发现参与AURKB活性调控。因此，目前主流的观点认为AURKB主要以翻译后修饰的形式在有丝分裂进程中发挥功能。虽然先前有研究人员在宫颈癌组织细胞HeLa中看到了一个分子量较小的AURKB蛋白的存在。但是，当时并没明确研究这个小分子量的AURKB蛋白的由来。之后亦有研究人员利用定量PCR技术在肝癌组织中发现了AURKB存在可变剪切转录本，其中AURKB-SV2被认为和肝癌的恶性程度相关。目前为止，虽已在肝癌组织中发现存在4条AURKB可变剪切转录本，但是并无研究显示AURKB是否会以切割蛋白产物的形式存在于肿瘤细胞中，以及这些切割蛋白产物所具有的潜在生物生理学功能。

目前已有多种靶向AURKB蛋白激酶活性的小分子药物被开发，包括AZD1152，PHA-680632，PHA-739358和Hesperidin等。尽管通过小分子药物靶向抑制激酶活性在多种癌症的治疗中取得了较好的疗效，但是由激酶催化位点无意义突变所造成的治疗性激酶抑制剂耐受，是临床治疗中的的棘手问题，因此，单一靶向AURKB激酶活性的小分子抑制，不足以有效控制肿瘤的进程，寻找不依赖于激酶活性的AURKB功能调控方式，在多靶向AURKB治疗肿瘤中具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种新的肿瘤标志物。

本发明要解决的另一技术问题是提供所述的肿瘤标志物AURKB蛋白切割位点在靶向药物开发中的应用。

本发明基于前期大量研究发现，AURKB蛋白上存在功能性蛋白切割位点，主要切割位点位于AURKB蛋白N和C末端。KSHV(卡波氏肉瘤疱疹病毒)病毒感染能够有效促进AURKB蛋白N末端切割。其中AURKB蛋白N末端切割产物能够调控有丝分裂不同时期的进程，显著缩短有丝分裂前期到后期的转变时间，促进KSHV相关肿瘤细胞的快速生长和成瘤能力。

本发明提供了一种肿瘤标志物，它是AURKB蛋白切割产物；其切割位点是D75、D76、K85、D186、D238、D255或者D289中的一个或者若干个。