[发明专利]利用竞争法快速检测禽流感、人流感易感人群的试纸条及试纸卡

说明书

本发明公开了一种利用竞争法快速检测禽流感、人流感易感人群的试纸条及试纸卡。该试纸条(卡)包括用于检测禽流感易感人群的Ⅰ型试纸条(卡)和/或用于检测人流感易感人群的Ⅱ型试纸条(卡)，试纸条(卡)包括沿层析方向依次设置的样品垫、胶体金标记垫、检测反应区以及吸水垫。本发明所述的试纸条(卡)检测灵敏度高，假阳性和假阴性率低，使用方便，容易观察区别，适合于临床快速诊断和基层流行病学调查等中大规模应用。

技术领域

本发明属于生化检测技术领域，具体涉及一种基于胶体金免疫层析技术快速检测禽流感和人流感病毒易感人群的试纸条(卡)。

背景技术

流感病毒在自然界中的宿主分布非常广泛，具有复杂的基因结构，且其基因发生重配和突变的概率很高，因此在全球范围内呈周期性流行。流感具有发病率及病死率高、传播速度快、波及范围广等特点，一旦爆发起来，将会对人类造成严重的灾难。流感病毒表面有一种重要的结构蛋白，呈H聚体的形式存在，称为血凝素(HA)，流感病毒侵入人体的方式主要是通过其表面的血凝素(HA)结构与宿主细胞表面特异性糖链受体结合进而感染宿主，HA主要识别的唾液酸分子会通过其末端的C原子与α2-3和Gal相结合形成SAα2-3Gal的结构或是形成SAα2-6Gal的结构，具有这样的宿主细胞表面结构与HA的结合具有特异性。不同类型的流感病毒结合宿主细胞表面糖链末端结构类型不同，其中，人流感病毒特异性识别的唾液酸糖链末端结构为SAα2-6Gal；禽流感病毒主要识别SAα2-3Gal唾液酸糖链末端结构。由于人体唾液中具有可封闭病毒表面的糖链末端结构，因此它的含量多少可以用来判断对于流感病毒的易感性。

凝集素是一类能够与糖蛋白或糖脂表面的糖链结构发生结合的非酶蛋白，但它并没有类似于抗体的免疫活性。西洋接骨木凝集素(Sambucus Nigra Lectin，SNA)和马鞍树凝集素-II(Maackia Aimrensis Lectin-II，MAL-II)与流感病毒HA特异性识别的区域具有相似性；其中，SNA特异性识别末端为SAα2-6Gal的糖链受体结构，这与人流感病毒特异性结合的位点具有相似性；MAL-II特异性识别末端为SAα2-3Gal的糖链受体结构，这与禽流感病毒特异性结合的位点具有相似性。中国专利“一种用于筛查禽流感和人流感病毒易感人群的检测工具”(公开号：CN103884834A)披露了凝集素MAL-II与禽流感易感性以及凝集素SNA与人流感病毒易感性的相关关系，并指出，易感人群唾液中与对应凝集素MAL-II或SNA结合的α2-3或α2-6连接末端唾液酸糖链结构的表达水平显著下调，但是该专利仅应用于芯片试剂盒，检测的简便性、速度和成本均有待改进。

中国专利“快速检测禽流感和人流感易感人群的方法以及试纸条”(公开号：CN106771120A)披露了基于胶体金层析技术快速检测禽流感和人流感病毒易感人群的试纸条，其反应原理为双凝集素夹心法。但由于凝集素不具有类似于抗体的免疫活性，凝集素与唾液酸糖蛋白在结合的特异性上，无法与抗原抗体结合反应相提并论。对于检测唾液酸糖蛋白这类具有抗原性质的物质，采用竞争法更为合理，既体现了凝集素特异性结合的专属性，又使检测原理更加清晰，影响检测结果的因素也会变得更少，从而降低检测结果的假阳性和假阴性。但检测样品的处理、金标垫上的凝集素浓度、检测线上的包被物及其浓度筛选具有了更大的难度，需要通过技术攻关才能确定，保证检测结果的准确性、可靠性。目前尚未见到使用竞争法原理检测禽流感和人流感易感人群的胶体金试纸条(卡)的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用竞争法快速检测禽流感、人流感易感人群的试纸条及试纸卡。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：