[发明专利]一种有效提高杂交构树组培苗生根率的方法

说明书

本发明公开了一种有效提高杂交构树组培苗生根率的方法，包括下列步骤：1)使用转种7代以上无根苗生根；2)将无菌过滤后的无根苗的幼嫩茎尖切割为1～2cm，暗处理，诱导；3)将步骤2)诱导所得进行一步生根；4)在步骤3)一步生根完成后，进行暗处理4～6d，随后进行二步生根,二步生根使用液固培养基为：珍珠岩15～20g/ml、液体培养基55～60ml；5)二步生根进行光照20～30d；能减少种苗带病毒的几率；在增殖阶段诱导丛生芽，提高了增殖倍数，增殖倍数在6‑8倍以上；明显提高对组培苗的生根率，生根率为97％；移栽成活率为99％。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体的说，是一种有效提高杂交构树组培苗生根率的方法。

背景技术

由于木本植物更长的生理年限，更多的染色体数、高度的皮层与木质部分化，以及科研教育体制等因素，我国众多研究单位进行的大量研究成果脱离于商业生产的经济可行性，性状稳定性、种苗整齐度等各项指标，无法应用于大规模商业生产。而利用木本植物组织培养技术进行种苗繁育的商业活动只在最近几年才刚刚开始。

制约木本植物组培育苗产业发展的主要技术原因体现在：外植体木质部带菌、增殖愈伤化、以及难生根等。木本植物组培无菌诱导生根经常出现不生根、根系愈伤化等现象造成组培苗移栽成活率低下，生产成本高昂。

发明内容

为了弥补以上不足，本发明提供了一种有效提高杂交构树组培苗生根率的方法。

本发明的方案是：

一种有效提高杂交构树组培苗生根率的方法，包括下列步骤：

1)使用转种7代以上无根苗生根，所述无根苗的幼嫩茎尖切口用无菌水洗，并在无菌滤纸上吸干水后接种；

2)将无菌过滤后的无根苗的幼嫩茎尖切割为1～2cm，暗处理2～5d接种于增殖培养基，诱导；

3)将步骤2)诱导所得进行一步生根，一步生根中使用改良WPM培养基为：适量的改良WPM、蔗糖15～25g/L、NAA 0.1～0.5g/L、IBA 0.1～0.2g/L、ABT 0.1～0.2g/L、AC 0～0.1g/L、琼脂6～7g/L；

4)在步骤3)一步生根完成后，进行暗处理4～6d，随后进行二步生根,二步生根使用液固培养基为：珍珠岩15～20g/ml、液体培养基55～60ml；

5)二步生根进行光照20～30d，所述二步生根中液固培养基中带芽茎段长出新芽、新根即得到生根苗。

作为优选的技术方案，改良WPM培养基为：适量的改良WPM、蔗糖20g/L、NAA 0.3g/L、IBA 0.1g/L、ABT 0.1g/L、琼脂6.8g/L。