[发明专利]一种刺参来源的ACE抑制活性肽

说明书

本发明属于海洋生物小分子活性肽领域，具体涉及刺参酶解来源的ACE抑制活性肽，其氨基酸序列为Gly‑Pro‑Ala‑Gly‑Pro‑Thr‑Gly‑Pro‑Thr。本发明将刺参匀浆后通过复合蛋白酶进行酶解，酶解产物经超滤膜进行分离，再通过Sephadex LH‑20柱层析、高效液相色谱分离纯化得到该小分子活性肽。本发明的活性肽具有较好的ACE抑制活性，分子量小，分离纯化步骤简单，易于制备，纯度高，属于食源性降压肽，通过长期食用达到预防、控制、缓解和辅助治疗高血压的目的，用于高血压等相关疾病的治疗和保健，在食品、保健品及医药领域等有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于海洋生物小分子活性肽领域，具体涉及刺参酶解来源的ACE抑制活性肽。

背景技术

ACE抑制肽是一类具有显著降低血压功效的肽，通常为小分子肽，它通过抑制ACE活性而起到降低血压的作用，同化学合成的ACE抑制剂相比，因其毒副作用小而成为研究的热点，并展现了广阔的开发前景，目前已有众多利用动植物资源生产降压肽的报道，如大豆蛋白、乳清蛋白、玉米蛋白等，但大多集中在陆地蛋白资源，我国海域资源丰富，拥有众多优质的蛋白质资源，海洋蛋白来源的多肽是开发研究海洋多肽药物与功能性保健食品的原料宝库，目前已有从不同海洋来源的蛋白生产ACE抑制肽的报道，如虾、牡蛎、海蜇、鳕鱼、海马等。专利CN 102517364 A报道了一种利用海参制备ACE 抑制肽的方法，但是未有海参来源的ACE抑制活性肽分离纯化的报道。

发明内容

本发明针对上述存在问题、现状及发展前景，从刺参低聚肽中分离纯化获得一种刺参来源的ACE抑制活性肽，该抗ACE抑制肽分子量小，易于分离纯化，制备工艺简单，纯度高，活性好，在食品、保健品及医药生物领域有广阔的应用前景。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：一种刺参来源的ACE抑制活性肽，其特征在于，所述活性肽其氨基酸序列为Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Pro-Thr。

以所述活性肽序列为核心，任何对其进行的相应的调整或修饰。

所述活性肽具有ACE抑制活性，可应用于制备具有调节血压作用的保健食品和药物。

所述活性肽的分离纯化方法，包括以下步骤：

S1、刺参酶解产物的制备

新鲜刺参体壁加入2～3 倍质量体积的水制成匀浆液置于酶解罐中，然后加入刺参质量的2～5‰的复合蛋白酶，在40～50℃下酶解4小时，酶反应pH 值控制在8.0～9.0，酶解结束后升温至90℃灭酶10分钟，得到刺参蛋白酶解液；

S2、刺参蛋白酶解液的超滤膜分离

上述获得的刺参蛋白酶解液在8000转/分钟离心10分钟，除去颗粒状物质，然后采用截留分子量为3000 Da的超滤膜进行分子量分离，获得膜分离样品，该样品在60℃温度下真空减压浓缩至一定体积，冷冻干燥得小分子活性肽产品；

S3、小分子活性肽的分离纯化

将S2中的小分子活性肽粗品加水溶解，配制成浓度为100 mg/mL的溶液，采用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱分进行分离纯化，流动相为30%甲醇，流速为0.3 ～0.5 mL/min，洗脱液280 nm测定吸光度，根据吸光度值收集所需各峰，冷冻干燥得到小分子活性肽粗品；

S4、小分子活性肽的高效液相色谱纯化及氨基酸序列测定