[发明专利]一种泰山天花提取物及其在制备抗咽炎药物中的应用

权利要求书

1.一种泰山天花提取物的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）取泰山天花子实体粉碎后加入去离子水0~8℃条件下抽提10~14h后，6000~10000rpm转速离心15~25min后取上清液；

（2）向上清液中加入硫酸铵固体使上清中硫酸铵浓度达到70%；沉淀3~5h后离心，800~1200rpm离心10~20min后弃去上清，留沉淀；

（3）向沉淀中加入去离子水溶解，然后用分子量为3kD的透析膜透析10h，透析期间更换去离子水；

（4）向透析袋内的抽提液中加入1M pH为3.54的醋酸-醋酸钠缓冲溶液进行等电点蛋白沉淀，沉淀后离心，保留沉淀部分并透析；

（5）透析完成后的溶液进行Q-Sepharose阴离子交换梯度层析，收集500 mM洗脱组分中抗金黄色葡萄球菌的组分并进行透析，所述Q-Sepharose阴离子交换梯度层析的缓冲液为10 mM pH 7.4 HAc-NaAc，分别用浓度为200 mM、500 mM和 1M NaCl洗脱液进行洗脱，将收集的Q-Sepharose阴离子交换梯度层析并透析后的组分进行DEAE-cellulose 阴离子交换梯度层析，收集300 mM洗脱组分中抗金黄色葡萄球菌的组分并进行透析，所述DEAE-cellulose 阴离子交换梯度层析的缓冲液为pH 5.4 Tris-HCl，分别用浓度为150 mM、300mM和 1M NaCl洗脱液进行洗脱，将收集的DEAE-cellulose 阴离子交换梯度层析并透析后的组分进行Q-Sepharose阴离子交换线性层析，收集有抗金黄色葡萄球菌的组分并透析；所述Q-Sepharose阴离子交换线性层析，缓冲液为pH 4.6 Hac-NaAc，线性梯度为0-250mMNaCl；

（6）将透析完成后的溶液通过分子量为50kD的超滤膜进行超滤，完成后浓缩至溶液体积减少为50mL，保留滤膜上层溶液。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中泰山天花子实体，用粉碎机粉碎后按照1：10的质量比加入去离子水后，在4℃低温抽提12h，然后8000rpm，离心20min，取上清。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中加入硫酸铵后沉淀4h，之后转速为1000rpm离心15min。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，醋酸-醋酸钠缓冲溶液与提取液的体积比例为1:10，沉淀后12000 rpm 离心10 min，弃上清，保留沉淀部分。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（6）中，向超滤装置中加入去离子水重复超滤浓缩的步骤。

6.权利要求1-5任一项制备方法得到的泰山天花提取物。

7.一种用于咽炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物包括权利要求6所述的泰山天花提取物。

8.如权利要求7所述的一种用于咽炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物还包括药学上可接受的辅料。

9.权利要求6所述的泰山天花提取物或权利要求7或8所述的药物组合物在制备抗咽炎药物中的应用。