[发明专利]一种检测致病菌的纳米生物探针及其制备方法有效
申请号: | 201811217049.7 | 申请日: | 2018-10-18 |
公开(公告)号: | CN109536571B | 公开(公告)日: | 2022-11-04 |
发明(设计)人: | 杨蓉;韩秋森;王新环;刘学良;王琛 | 申请(专利权)人: | 国家纳米科学中心 |
主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18;G01N33/569;G01N33/535;C12R1/445;C12R1/19 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王莹;吴欢燕 |
地址: | 100190 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 致病菌 纳米 生物 探针 及其 制备 方法 | ||
1.一种检测致病菌的纳米生物探针,其特征在于,由磁性核壳纳米结构和针对致病菌的特异性识别分子偶联组成,所述磁性核壳纳米结构以四氧化三铁颗粒为核心、嵌有铂颗粒的二氧化硅层为壳层,整体带负电,具有模拟过氧化物酶活性;所述特异性识别分子为抗体、靶向多肽、核酸适配体和抗生素中的一种或多种;
所述磁性核壳纳米结构的尺寸为30~50nm,其中四氧化三铁颗粒大小为10~20nm,二氧化硅层厚度为5~10nm,铂颗粒大小为2~3nm;
所述纳米生物探针的制备方法包括以下步骤:
(1)将分散在有机相中的四氧化三铁分散在聚乙二醇辛基苯基醚/正己醇/水混合溶液中,形成反向微乳体系,然后添加氨水和正硅酸乙酯,使正硅酸乙酯在碱性环境下水解形成二氧化硅包覆层,制备得到四氧化三铁-二氧化硅颗粒;其中,分散在有机相中的四氧化三铁浓度为1~10mg/mL;聚乙二醇辛基苯基醚/正己醇/水混合溶液中聚乙二醇辛基苯基醚、正己醇和水的摩尔比例为1:2:4~8;正硅酸乙酯、四氧化三铁、氨水的质量比为1:5:1;
(2)将所述四氧化三铁-二氧化硅颗粒和3-氨丙基三甲氧基硅氧烷混合,进行氨基化修饰,二者质量比为1:10~1:100,反应时间为4~24h,使其表面带正电;
(3)通过静电吸附作用使铂颗粒负载在所述带正电的四氧化三铁-二氧化硅颗粒表面,两者质量比为1:10,制备得到磁性核壳纳米结构;
(4)将所述磁性核壳纳米结构和针对致病菌的特异性识别分子采用戊二醛间隔臂法进行偶联。
2.权利要求1所述的纳米生物探针在制备致病菌检测试剂盒中的应用。
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