[发明专利]利用MFC评价电磁辐射对生物体能量代谢影响的方法

权利要求书

1.利用MFC评价电磁辐射对生物体能量代谢影响的方法，其特征在于，所述评价方法建立步骤包括：

（1）菌株培养：挑取单菌落至液体培养基中，培养10~18 h，离心收集菌体，用0.5 mL，pH7.0的PBS缓冲液重悬，制得MFC接种液；

（2）MFC构建：MFC装置由两个100 mL的玻璃瓶连接构成，阳极电极为碳板，阴极电极为碳毡，中间用阳离子交换膜隔开，两个电极通过连接外电阻形成闭合回路，MFC接种液接种于阳极室，用于提供电子，阴极利用空气中的氧气接收电子；

（3）电流采集：将MFC放置于在电磁场实验装置中，当MFC所产电流升至0.2-0.5 mA时，开启电磁场，并利用数据采集装置记录MFC所产生的电流；

（4）标准曲线制作：计算不同强度电磁场处理条件下微生物代谢电流的标准偏差，以标准偏差数值代表电流的波幅，绘制电磁场强度-电流波幅标准曲线，利用线性拟合原理建立拟合公式；

所述步骤（2）中MFC装置组装好后，阳极加入已灭菌、除氧的阳极液80 mL，接入MFC接种液，阳极室瓶盖与瓶口之间加硅胶垫密封防止外界空气进入；阴极加入阴极液80 mL，MFC工作时，阴极室不断通入空气，以溶解氧作为电子受体；整个实验过程中MFC均连接外电阻形成闭合电路；所述阳极液由以下成分组成：NaHCO₃ 2.5 g/L，KCl 0.1 g/L，NH₄Cl 0.25 g/L，NaH₂PO₄ 0.6 g/L，10 mL维生素母液，10 mL微量元素母液，调节pH为7.2后，加入终浓度为15mM的乙酸钠；阴极液为终浓度0.2 M的 PBS缓冲液，pH 7.0；所述维生素母液由以下成分组成：生物素 2.0 mg/L，叶酸 2.0 mg/L，盐酸吡哆醇 10.0 mg/L，核黄素 5.0 mg/L，硫胺素5.0 mg/L，烟酸 5.0 mg/L，泛酸 5.0 mg/L，钴胺素 0.1 mg/L，对氨基苯甲酸 5.0 mg/L，硫辛酸 5.0 mg/L；

所述微量元素母液由以下成分组成：氨三乙酸三钠 1.5 g/L，MgSO₄·7H₂O 3.0 g/L，MnSO₄·H₂O 0.5 g/L，NaCl 1.0 g/L，FeSO₄·7H₂O 0.1 g/L，CaCl₂ 0.1 g/L，CoCl₂·6H₂O0.1 g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.1 g/L，Cu₂SO₄·5H₂O 0.01 g/L，AlK(SO₄)₂·12H₂O 0.01 g/L，H₃BO₃ 0.01 g/L，Na₂MoO₄ 0.025 g/L， NiCl₂·6H₂O 0.024 g/L，Na₂WO₄·2H₂O 0.025 g/L；所述步骤（3）中，电磁场实验装置的电磁场强度从1 Gs开始，以每20~60 min翻一倍的方式增强，数据采集设为1~10 s/次；所述步骤（1）中菌株为任意可厌氧培养的具有产电活性的微生物。

2.根据权利要求1所述利用MFC评价电磁辐射对生物体能量代谢影响的方法，其特征在于：所述步骤（2）中MFC阴极电极碳毡表面涂覆0.5 mg/cm² 的Pt以提高氧气接收电子的能力。

3.如权利要求1~2任一项所述利用MFC评价电磁辐射对生物体能量代谢影响的方法在评价电磁场对生物细胞能量代谢影响中的应用。