[发明专利]基于酞菁铜分子的诊疗一体化纳米探针及其制备和应用

权利要求书

1.一种基于酞菁铜分子的诊疗一体化纳米探针，其特征在于，所述诊疗一体化纳米探针包括六方氮化硼纳米片，酞菁铜分子以及两组寡核苷酸结合序列，所述六方氮化硼纳米片与装载酞菁铜分子的寡核苷酸结合序列通过π-π堆积作用结合；其中，所述两组寡核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1~2所示。

2.根据权利要求1所述的基于酞菁铜分子的诊疗一体化纳米探针，其特征在于，所述寡核苷酸序列为AS1411修饰。

3.根据权利要求1所述的基于酞菁铜分子的诊疗一体化纳米探针，其特征在于，所述六方氮化硼纳米片的粒径为80~100nm，厚度为14-16nm。

4.一种基于酞菁铜分子的诊疗一体化纳米探针的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）六方氮化硼纳米片的制备

在浓硫酸中，六方氮化硼粉末，高锰酸钾和过氧化氢进行水热反应，然后再通过超声处理，得到所述的六方氮化硼纳米片；

（2）酞菁铜-核苷酸序列复合物的制备

（2-1）将两组寡核苷酸结合序列溶于缓冲液中，分别在水浴锅中加热，然后缓慢冷却至室温，形成二级结构HG1和HG2；所述两组寡核苷酸结合序列分别为如SEQ ID NO.1~2所示；

（2-2）将得到的二级结构HG1和HG2与酞菁铜分子孵育，得到酞菁铜-核苷酸序列复合物CuPc@HG；

（3）诊疗一体化探针的制备

将步骤（2）制备的酞菁铜-核苷酸序列复合物与步骤（1）制备的六方氮化硼纳米片混合孵育，得到所述基于酞菁铜分子的诊疗一体化探针CuPc@HG@BN。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述水热反应的温度为0℃；和/或，所述水热反应的时间为10~14h；和/或，所述六方氮化硼粉末，高锰酸钾和过氧化氢的质量比为（1-2）：（0.5-1.5）：（8-11）；和/或，所述超声的条件为85-110kW；和/或，所述超声的时间为0.5~2h。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（2-1）中，所述缓冲液的配方是25~30mM Tris-HCl，175~225mM KCl，2~5mM MgCl₂，pH=7.2~7.5；和/或，溶于缓冲液中后，所述两组寡核苷酸结合序列的终浓度分别为5-20µM；和/或，所述加热的温度为90-98℃；和/或，所述加热的时间为3-10min。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（2-2）中，所述二级结构与酞菁铜分子的摩尔比为（0.5：2）~（2：1）；和/或，所述孵育的温度为35~40℃；和/或，所述孵育的时间为1~3h。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，混合后，所述酞菁铜-核苷酸序列复合物的终浓度为15~25µM；和/或，混合后，所述六方氮化硼纳米片的终浓度为90~120µg/ml；和/或，所述孵育的温度为35~40℃；和/或，所述孵育的时间为10-30min。

9.一种根据权利要求4所述方法制备得到的基于酞菁铜分子的诊疗一体化纳米探针。

10.根据权利要求1或9所述的诊疗一体化探针在制备体内检测microRNA-21的试剂中的应用。

11.根据权利要求1或9所述的诊疗一体化探针在制备用于细胞内microRNA-21成像及生物传感的产品中的应用。

12.根据权利要求1或9所述的诊疗一体化探针在制备光动力治疗肿瘤的药物中的应用。