[发明专利]一种基于纳米银胶表面拉曼增强检测酮康唑的方法

说明书

本发明公开了一种基于纳米银胶表面拉曼增强检测酮康唑的方法，利用接枝巯基化合物制备的疏水基底等为材料。把不同浓度的酮康唑溶液与纳米银胶混合，离心分离，并利用激光拉曼光谱仪进行测试，得到酮康唑的SERS光谱图。获取一定波数的酮康唑拉曼光谱吸收强度与浓度之间的关系，建立拉曼光谱吸收强度与酮康唑浓度之间的数学关系。利用激光拉曼光谱仪对未知浓度的酮康唑溶液进行测试，依据一定波数下酮康唑拉曼光谱吸收强度与酮康唑浓度之间的数学关系推算出酮康唑的浓度。本发明解决了目前酮康唑检测费用昂贵，试样需要多步分离等问题，具有易于操作，灵敏度高，能节省大量经济与时间成本的优点，有着广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于检测的技术领域，具体涉及一种基于纳米银胶表面拉曼增强检测酮康唑的方法。

背景技术

酮康唑属于抗真菌药，对皮肤癣菌如毛发癣菌属、表皮癣菌属、小孢子菌属及酵母菌如念珠菌等具有抑制作用。但酮康唑有发生严重肝毒性的风险，所以只有在考虑过其它有效的抗真菌治疗后，由于其感染部位、面积及深度等因素导致局部治疗无效时，方可使用。

抗菌剂残留检测的传统方法主要有：质谱分析、毛细管电泳、色谱分析、免疫分析法等，这些方法的可靠性都很高，但都比较费时，且由于样品前期处理过程复杂等原因，造成分析成本相对来说较高，步骤复杂、导致难以推广以及标准化。

表面增强拉曼光谱技术（SERS）对检测样品的需要量少，对样品无破坏性，而且灵敏度高的优点。同时基于激光技术、计算机技术的快速良好的发展，特别是纳米技术的不断拓宽与日益成熟，为SERS技术不断提供多样化、增强效应好的活性基底，使SERS技术的应用领域也不断扩展。由于对样品的非破坏性以及峰位对激发光的不依赖性和指纹式的分辨能力，因而可以实现物质的痕量探测。

目前，研究者们制备出很多溶胶状纳米颗粒，极大程度增强了拉曼效应，也降低了检测限。但是，拉曼检测时，常用的基材为铝片、玻璃片等，溶液的接触角比较小，易扩散，待测分子分散，检测限度低等缺点。

发明内容

为了克服现有酮康唑检测存在的费用高、预处理复杂、耗时长等问题，本发明的目的是提供一种痕量酮康唑的快速检测方法，具有易于操作，灵敏度高，能节省大量经济与时间成本的优点。可以广泛应用于食品、药品、环境等领域中样品的检测。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种基于纳米银胶表面拉曼增强检测酮康唑的方法，包括以下步骤：

（1）纳米银胶的制备

取15-30μL浓度为0.5mol/L的AgNO₃溶液加入盛有10mL超纯水的三角烧瓶中，再加入5-15μL浓度为0.1mol/L的四盐酸精铵，通过磁力搅拌混合均匀，搅拌过程避光脱氮气30min，接着，在搅拌速度为1000-1200r/min的条件下，逐滴加入200-350μL新配置的浓度为0.01mol/L的硼氢化钠，再持续搅拌20min,溶液出现亮黄色，银胶形成，离心取下层溶液，即得纳米银胶；

（2）将步骤（1）制备的纳米银胶分别与等体积配置好的4-8个不同浓度梯度的酮康唑标准水溶液进行混合，离心分离，收集沉淀部分，滴在基底材料上，使用雷尼绍拉曼光谱仪进行拉曼信号的检测，得到对应浓度的SERS谱图；

（3）取相对应的步骤（1）制备的纳米银胶单独进行拉曼光谱测试，得到纳米银胶本底拉曼信号；用纳米银胶本底拉曼信号作为内标对酮康唑标准水溶液表面增强拉曼光谱进行归一化；建立酮康唑标准水溶液拉曼光谱谱线相对强度-浓度标准对照工作曲线；

（4）检测未知样品浓度：将未知浓度的带测定的样品与步骤（1）制备的纳米银胶混合，然后利用激光拉曼光谱仪进行测试，并进行谱峰强度归一化处理得到未知浓度的酮康唑溶液表面增强拉曼光谱谱图；通过公式算出酮康唑的浓度。