[发明专利]筛选分析、鉴别药剂的方法及药物组合物

权利要求书

1.一种用于鉴别诱导哺乳动物消化道不产生胰岛素的肠内分泌祖细胞表达胰岛素的药剂的基于细胞的高通量筛选分析方法，该方法包括下述步骤：

a.提供消化道不产生胰岛素的肠内分泌祖细胞的对照细胞群和测试细胞群，

b.将测试细胞群和测试药剂接触，

c.测定对照细胞群和测试细胞群的胰岛素表达水平，和

d.如果测试细胞群中的胰岛素水平明显高于对照细胞群中的胰岛素水平，筛选出该测试药剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，在消化道不产生胰岛素的肠内分泌祖细胞中，编码胰岛素的基因与被可视化的蛋白或肽可操作连接。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述蛋白或肽是荧光蛋白。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，所述蛋白或肽是选自由碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、荧光素酶、尿素酶和β半乳糖苷酶组成的组中的成员。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述药剂对治疗糖尿病具有疗效。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中，筛选了药剂文库。

7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中，所述药剂降低Foxo1、Foxo3、Foxo4或它们的组合的表达。

8.一种用于鉴别诱导不产生胰岛素的肠内分泌细胞分化为产生胰岛素的细胞的药剂的方法，该方法包括：

(a)准备胰腺功能均受损的非人类测试动物和非人类对照动物，

(b)用药剂对测试动物进行给药，

(c)测试两个动物中产生胰岛素的细胞的指标的水平，所述指标选自由血清胰岛素、胰岛素敏感性和葡萄糖耐受性组成的组中，和

(d)如果与对照动物相比，所述指标在测试动物中显著增加，则将该药剂鉴别为诱导不产生胰岛素的肠内分泌细胞分化为产生胰岛素的细胞的药剂。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述药剂对治疗糖尿病具有效果。

10.一种鉴别对治疗或预防糖尿病具有效果的药剂的方法，该方法包括：

(a)准备患有糖尿病的非人类动物，

(b)测定取自动物的肠内分泌细胞的处理前的样品中的Foxo1表达的量；

(c)用药剂对动物进行给药；和

(d)测定取自动物的肠内分泌细胞的处理后的样品中的Foxo1表达的量；其中，如果处理后的样品中的量显著低于处理前的样品中的量，则该药剂被鉴别为对治疗或预防糖尿病具有效果的药剂。

11.一种用于治疗低胰岛素的药物组合物，其包含有效量的降低Foxo1或其生物活性片段的表达或生物活性的药剂，所述Foxo1或其生物活性片段选自由与编码Foxo1的基因或mRNA充分互补的分离的shRNA、siRNA、反义RNA、反义DNA、嵌合反义DNA/RNA、microRNA、核酶、以及与Foxo1特异性结合从而降低Foxo1的生物活性的抗体或其生物活性片段或变体组成的组。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其中，所述有效剂量为产生血清胰岛素增加的量。

13.根据权利要求11所述的药物组合物，其被配制成在由哺乳动物的回肠、十二指肠和结肠组成的消化道区域释放治疗有效量。

14.根据权利要求11所述的药物组合物，其被配制用于局部给药到哺乳动物的回肠、十二指肠或结肠内或哺乳动物的回肠、十二指肠或结肠上。