[发明专利]用于小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物的保存液及其制备方法

说明书

本发明涉及体外诊断领域，具体而言，涉及用于小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物的保存液及其制备方法。用于小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物的保存液，所述保存液的溶剂为水，以所述保存液的体积计，各组分及其含量如下：缓冲盐0.02‑0.05mol/L、蛋白物质3‑30g/L、盐离子0.1‑0.4mol/L、糖类物质5‑50g/L、表面活性剂0.5‑5g/L、稳定剂50‑270g/L、防腐剂0.5‑5g/L；所述保存液的pH为7.0‑8.0。可以有效稳定甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)与碱性磷酸酶标记结合物在保存液中37℃保存7天后的活性。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，具体而言，涉及用于小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物的保存液及其制备方法。

背景技术

目前体外诊断领域应用常用免疫检测方法主要化学发光免疫分析(CLIA)，此方法已经广泛应用于病毒学、内分泌学、肿瘤学、生殖生理学、血液学、遗传学等医学和生物学各科的临床和科研工作中。其中酶促化学发光免疫分析中需要用到碱性磷酸酶的标记结合物，碱性磷酸酶的标记结合物的高灵敏度和良好的稳定性是高质量化学发光分析试剂的必要保证。

在化学发光试剂临床应用领域中，使用竞争法检测小分子抗原如：甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)，常需要将小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合，而小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物配制到普通的缓冲液中后很容易使其丧失活性，目前常用的酶结合物保存液不能有效地保持小分子抗原与碱性磷酸酶(ALP)结合物的活性。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明提供的是一种涉及体外诊断试剂中用于小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物的保存液及其制备方法，特别是甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)与碱性磷酸酶标记结合物的一种保存液。用该保存液配制甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸与碱性磷酸酶标记结合物溶液，能有效的维护甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸与碱性磷酸酶标记结合物在储存和使用中的稳定性，充分满足体外诊断试剂盒的质量要求。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

用于小分子抗原与碱性磷酸酶标记结合物的保存液，所述保存液的溶剂为水，以所述保存液的体积计，各组分及其含量如下：缓冲盐0.02-0.05mol/L、蛋白物质3-30g/L、盐离子0.1-0.4mol/L、糖类物质5-50g/L、表面活性剂0.5-5g/L、稳定剂50-270g/L、防腐剂0.5-5g/L；所述保存液的pH为7.0-8.0。

甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)是由甲状腺分泌的两种含碘激素，负责调节人体物质与能量代谢，促进人体生长和发育过程。正常人血液中，T3、T4以游离型和蛋白结合型存在，两种形式呈动态平衡。血液中99.6％以上的总Τ3、总Τ4以蛋白结合型存在，仅有0.2％-0.4％的总Τ3、总Τ4作为未结合型或游离型存在于血液中。游离甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)的测定容易受到试剂缓冲液中缓冲组分、蛋白、盐离子、表面活性剂等种类及含量的影响。

本发明提供的保存液含有特定种类及含量的缓冲组分、蛋白、盐离子、表面活性剂、糖类物质、稳定剂、防腐剂等物质，各组分以以一定的比例配合，可以有效稳定甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)与碱性磷酸酶标记结合物在溶液中37℃保存7天后的活性。

其中，添加蛋白物质防止溶液中碱性磷酸酶因吸附、分子间聚合和蛋白酶水解等因素导致的变性影响。

碱性磷酸酶为一种二聚体蛋白，是一种含锌的金属酶，Zn离子防止碱性磷酸酶受螯合剂影响失去锌离子失活，镁离子提高碱性磷酸酶催化水解反应效率，钠离子或钾离子提供溶液合适盐离子浓度。

增加溶剂水表面张力而导致碱性磷酸酶优先水化或者通过氢键与T4/T3和碱性磷酸酶结合物表面分子相联结，从而增加T4/T3和碱性磷酸酶结合物的稳定性。