[发明专利]一种Bcr-Abl融合蛋白检测方法

权利要求书

1.一种Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)制备捕获磁球：制备纳米磁球，将纳米磁球表面包裹硅壳，包硅磁球表面包裹金壳并通过连接抗Bcr抗体，使用BSA并填补纳米磁球金壳表面的空隙，形成捕获磁球；

(2)制备SERS探针：制备金属纳米棒，在金属纳米棒表面连接拉曼报告分子，将连接有拉曼报告分子的金属纳米棒表面连接抗c-Abl抗体，使用BSA填补金属纳米棒表面的空隙，形成SERS探针；

(3)融合蛋白检测：取CML细胞细胞裂解液，加入BBS缓冲液稀释，再与捕获磁球和SERS探针混合，将混合溶液放在摇床上孵育，磁力分离提纯，分离出的磁球烘干后采用SERS光谱成像检测，即可。

2.根据权利要求1所述的Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：所述步骤(2)制备SERS探针的方法为：向每毫升金属纳米棒溶液中加入10-11μL、8-10mM的拉曼报告分子，搅拌，离心清洗，去除多余的拉曼报告分子，再加入通过戊二醛间隔法修饰的抗c-Abl抗体，之后加入过量3-5wt％的BSA，离心清洗后重悬于BBS缓冲液中，冷藏，所述抗c-Abl抗体的用量为1-2μg抗c-Abl抗体对应金属纳米棒2-4mL。

3.根据权利要求1所述的Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：所述步骤(2)的金属纳米棒为金纳米棒，制备方法包括如下步骤：先采用CTAB辅助金种生长法制备金纳米棒，将合成的金纳米棒离心，清洗去除多余的CTAB，最后重悬于去离子水中，即可。

4.根据权利要求1所述的Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中金属纳米棒为金包银纳米棒，制备方法包括如下步骤：先采用CTAB辅助金种生长法制备金纳米棒，将合成的金纳米棒离心，清洗去除多余的CTAB，加入去离子水搅拌后获得金纳米棒溶液，之后，在25-28℃水浴搅拌下，取2-4mL金纳米棒溶液，向其中依次加入0.0728-0.08gCTAB，4-5mL去离子水，200-250μL、浓度为14-15mM的溶液，270-280μL、浓度为0.1-0.2M的抗坏血酸，475-480μL、浓度为0.1-0.2M的氢氧化钠，搅拌，待溶液变为酒红色溶液，在8000-10000rpm转速下离心清洗20-22min，重复清洗两次，最后重悬于去离子水中，即可。

5.根据权利要求1所述的Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：所述步骤(2)金属纳米棒为银纳米棒，采用湿化学法制备。

6.根据权利要求1所述的Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：所述步骤(1)将纳米磁球表面通过Stober法包裹硅壳。

7.根据权利要求1所述的Bcr-Abl融合蛋白检测方法，其特征在于：所述步骤(1)包硅磁球表面通过金种静电吸附和金种生长法包裹金壳。